practica

TRONCO COMUN DIVISIONAL DE CIENCIAS BIOLOGICAS Y DE LA SALUD.
MODULO: ENERGIA Y CONSUMO DE SUSTANCIAS FUNDAMENTALES.
PRACTICA No. 3
HIDRÓLISIS DEL ALMIDÓN POR AMILASA VEGETAL

OBJETIVO:Determinar la presencia de enzimas hidrolíticas durante la
germinación por el método colorimétrico tomado como factor el tiempo de
actividad enzimática.

GENERALIDADES: Investigación bibliográfica porparte de los estudiantes sobre
cinética enzimática de amilasa y factores que afectan la germinación.

MATERIAL POR EQUIPO:
11 Tubos de ensaye (16 x 150)
1 Gradilla
4 Pipetas graduadas de 1 ml(plástico)
1 Pipeta de 5 o 10 ml
1 Vaso de Precipitado de 250 ml
1 Mechero
1 Soporte Universal con anillo
1 Embudo de plástico
1 Mortero de porcelana con pistilo
1 Vaso de precipitado
1 Pipeta de 1ml.
REACTIVOS:
Solución de glucosa al 0.1%
Agua destilada
Acido 3,5-Dinitrosalicilico (DNS) en frasco ambar.

1

Solución de Yodo (I2Kl en una solución de HCl 0.05 N) en frasco ambar.Solución de CaCl2 20 mM-NaCl 200 Mm
Solución de Almidón al 0.2
Solución Buffer pH 5

APARATOS POR GRUPO:
1 Balanza Granataria
2 Espectrofotómetros
8 Celdas

LOS ALUMNOS DEBEN TRAER POR EQUIPO:10-12 Semillas de maíz (Zea mays) ó Frijol (Phaseolus vulgaris) de 7-8 días de
germinación.
1 plumón indeleble.
Jabón y franela para limpiar
Hielo
3 Sobres de gasa
Masking tape
Ligas.

METODO:1. Pesar de 10 a 12 semillas germinadas de maíz o fríjol de 7 a 8 días de
germinación para la obtención de la amilasa.
2. Moler las semillas en un mortero usando 3 ml de agua destilada por cadagramo de tejido.
3. Filtrar la molienda con ayuda del embudo y de dos capas de gasa.
4. Mantener el filtrado en un tubo de ensaye. Permitir que se sedimente y
mantenerlo en un baño de hielo.
5. Diluyael filtrado 1:10 con solución amortiguadora de acetato pH 5.0, seguir
manteniendo en frio.
6. Prepare la mezcla de reacción en dos tubos de ensaye (13 x 150 mm) de la
siguiente manera:

Tubo...