Practica

CUENTA DE RETICULOCITOS.

OBJETIVO ESPECÍFICO: El alumno efectuará e interpretará la cuenta de reticulocitos en sangre periférica humana.
INTROCUCCIÓN: Los reticulocitos son la etapa anterior del eritrocito en la escala de maduración y se localiza en médula ósea y sangre periférica; los restos de RNA que presentan se precipitan y aglutinan por la acción de colorantes supravitales, apareciendocomo gránulos o retículo teñidos de azul. La presencia de reticulocitos, mide la efectividad de la eritropoyesis. Una aumento puede interpretarse como indicación de una excesiva demanda de nuevos eritrocitos y una médula ósea competente; cuando la demanda disminuye o la médula ósea falla en su función, la cifra de eritrocitos jóvenes o reticulocitos disminuye.
Dado que el RNA del reticulocitos,desaparece a los pocos días de que entra el reticulocito a la sangre circulante, el recuento de estas células servirá como medida del número de células que libera la médula a la sangre; por lo tanto es una medida de la eritropoyesis eficaz.
El número normal absoluto de reticulocitos es aproximadamente de 24,000 a 84,000/mm3, es decir; del 0.5 al 1.5% de los eritrocitos circulantes. Si se conoceel número de eritrocitos puede calcularse la cifra de reticulocitos por mm3 de sangre multiplicando él % de reticulocitos por el número de hematíes.
Por ejemplo, si un paciente presenta un recuento eritrocitario de 2,89 millones/ mm3 y un recuento reticulocitario del 7% presentará un recuento reticulocitario absoluto de:

2.89 millones de eritrocitos/mm3 ………….100%
X.…………………………… 7%

X= 202,000/ mm3
Se observa que hay demasiados reticulocitos en la circulación, es decir existe reticulocitosis.

Biológico: sangre completa con anticoagulante EDTA.
Tubo y aguja vacutainer.
Soporte vacutainer
Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo.
Alcohol al 70% o alcohol yodado
Algodón.
Tubo de ensaye 10 X 75 mm.
Pipeta Pasteur.
Bulbo para pipeta Pasteur.Postaobjetos.
Colorante Nuevo Azul de Metileno o colorante azul de cresil brillante.
Aceite de inmersión.
Microscopio.

Preparación del colorante:
1gr de azul de cresil brillante se disuelve en 100 ml de solución salina citratada (la cual se prepara con una parte de citrato de sodio al 3% y 4 partes de Cloruro de sodio al 0.9%).

TÉCNICA:
1. Colocar 3 gotas del colorante en un pequeño tubo deensaye; añadir 3 gotas de sangre y mezclar.
2. Incubar a baño maría o en la incubadora durante 15 minutos a 20 grados centígrados
3. Mezclar bien la suspensión y preparar 2 extensiones sobre portaobjetos y dejarlo secar al aire.
4. Observar con el objetivo de inmersión, los reticulocitos presentan el RNA precipitado, siendo reticular y granuloso y teñido intensamente de azul. Los eritrocitosse observan de color azul pálido o azul verdoso.
5. Se cuentan por lo menos 100 células, las cuales deben observarse en diferentes partes de la extensión, anotándose los reticulocitos encontrados.

Valores normales:

Adultos.……………..…. 0.5 a 1.5 % o 24,000 a 84,000/ mm3
Recién nacidos………… de 2.5 a 6.5% (aunque este valor se normaliza a las 2 semanas




RESULTADOS (DIBUJOS YCOMENTARIOS):























Discusión

La metodología manual para el recuento de reticulocitos es la de mayor uso en los laboratorios clínicos, sin embargo, es una técnica que consume gran cantidad de tiempo y sus resultados suelen tener una alta variabilidad intra e inter observador, que genera una alta imprecisión y por ende resultados poco confiables.

Laincorporación de metodologías automatizadas, permiten al laboratorio obtener recuentos de reticulocitos de forma más rápida, con una mayor precisión debida al mayor número de células contadas (más de 30.000) y también porque se eliminan gran parte de las fuentes de error que se generan en la técnica manual, sin embargo, deben de corroborarse las virtudes que ofrecen estas tecnologías antes de su...