Practica

Extracción de ADN de tejidos vegetales
OBJETIVO:
El objetivo de esta práctica es tratar de extraer el ADN de células vegetales de una planta (en este caso una fresa) poniendo de manifiesto laestructura en forma de largas cadenas de esta molécula.

INTRODUCCIÓN:
El ADN que se encuentra en los genes es un componente de todas las células. Una vez rotas las células de la fresa, todoel material celular queda libre y, en presencia de detergente, se separan los componentes en base a su solubilidad. El ADN se precipita con alcohol y se separa del resto de los componentes por loque se pueden observar las pequeñas cadenas.

MATERIAL:
*Fresas
*Tijeras o cuchillo
*Embudo o colador
*Un pedazo de tela o gasa
*Tubo de plástico de diez mililitros
*Varilla de vidrio*Tubo appendorff
*Mortero
*Cuchara
*Vaso
*Arena o sal entera
* Alcohol de 96°
*Detergente
*Agua

DESARROLLO EXPERIMENTAL:
* Cortar el tejido con tijera o cuchillo en trozos pequeños.Triturar el tejido con el mortero(con un poco de arena o sal entera en caso de no contar con mortero)
* Tomar aproximadamente 1 ml. de tejido triturado y añadir aproximadamente 1 ml. de agua,mezclar muy bien con la cucharilla.
* Filtrar la muestra en un vaso utilizando el embudo o el colador a través de un pedazo de tela o trozo de gasa.
* Añadir al filtrado resultante unvolumen igual de la disolución de sal previamente preparada mezclando 10 g. de sal por cada 100 ml de agua.
* Tomar 2 ml de la disolución en un tubo de plástico de 10 ml y añadirle unas gotas dedetergente liquido mezclando bien evitando la formación de espuma.
* Añadir con suavidad 5 ml de alcohol frio en el tobo dejando que se formen dos fases.
* Agitar suavemente la interfase conuna varilla de vidrio para que se forme el precipitado de ADN que se enrolla en la varilla y se extrae.
* Coger el ADN con la varilla y depositarlo en el tubo eppendorff (para su transponte)