Practicas de banco de sangre
“Grupo RH (D)”
-Introducción
Técnicas como la aglutinación y la hemólisis son los métodos cualitativos más empleados en el Laboratorio del Banco de Sangre:
La presencia o ausencia del antígeno “D” es la que determina si un individuo es RH positivo o negativo.
-Objetivo
Determinar cuál es el tipo de rh del paciente si tiene o no ausencia del antígeno d
-Fundamento
Paraidentificar el aglutinógeno Rh se usa un antisuero específico, y su presencia se pone de manifiesto por la aglutinación de los eritrocitos
-Técnica
Se deposita una gota de una suspensión de glóbulos rojos al 5 por ciento en su propio suero en cada uno de dos tubos de 10 por 75mm; al primer tubo se le añade dos gotas de suero anti Rh (D) y al segundo tubo dos gotas de albumina.
Centrifugar los tubos a1000r.pm. Durante 90 segundos y re suspenda suavemente el sedimento para observar si hay aglutinación.
El tubo con albumina representa el testigo negativo.
-Material
*Reactivos:
- Suero anti Rh (D)
- Albumina al 22 o 30 por ciento
*Material y aparatos
-Los habituales de un laboratorio de inmunohematologia
Practica
Coumbs Directo
-Fundamento
Los eritrocitossensibilizados por un anticuerpo son aglutinados por el suero anti gammaglobulina (suero de coumbs)
-Introducción
Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glóbulos rojos y causar su destrucción prematura (hemólisis)
-Objetivo
-Material
*Reactivos:
-Suero de coumbs
-Solución salina isotónica
*Material y aparatos
- Los habituales de un laboratorio de inmunohematologia-Método
*Material biológico
-3ml. de sangre venosa sin anticoagulante
-Técnica
Depositar una gota de glóbulos rojos problema en un tubo de 10 por 75mm. Con pipeta Pasteur, añada solución salina y centrifugue un minuto a 3500 r.p.m. , repita este paso tres veces el lavado con solución salina en el ultimo lavado deje escurrir el tubo o séquelo con papel filtro, desprenda el precipitado y añadauna gota de suero de coumbs; centrifugue 20 segundos exactos a 3500 r.p.m.Lea macroscópicamente.
-Valores normales
*No existe aglutinación (negativo)
-Medidas de seguridad y control
*Utilizar células control para la prueba de coumbs si no se dispone de células comerciales, sensibilice glóbulos rojos “O” positivos lavados con solución salina y a una concentración de 50 por ciento; utilice unvolumen de estas células y agregue tres volúmenes de suero anti Rh (D) Diluido 1:64.
Incube 20 minutos a 37 grados centígrados, lave tres veces con solución salina y agregue suero de coumbs.
Practica
Auto e isoaglutininas anti eritrocitos:
-Fundamento:
Búsqueda de anticuerpos en suero problema con glóbulos rojos con antígenos conocidos.
Introduccion:
-Material y aparatos:
Reactivo-Solución de bromelina o fiscina
-Suero de coumbs (suero completo anti globulina humana)
-Solución de cloruro
Material y aparatos:
Los habituales de un laboratorio de inmunohematologia
-Método:
Material biológico
Muestras de glóbulos rojos conocidos (pool y kell) suspendidos al 5 % en solución de cloruro de sodio al 0.85 %, de los que se obtiene diariamente en el banco central de sangre.
5ml. de sangre coagulada del sujeto problema fraccionados en sus dos componentes suero y glóbulos rojos que se suspenden al 2% en solución de cloruro de sodio al 0.85%.
-Técnica
Se colocan en una gradilla siete tubos de 10 por 75 mm. Para cada problema y se marcan como sigue:
S TS Prueba salina
B TB Prueba con bromelina
C TC Prueba con albumina Coombs
K Prueba de Coombs para investigaranti”kell”
En cada uno de los siete tubos se depositan dos gotas de suero problema.
A los tubos marcados S,B y C se les agrega una gota de glóbulos rojos conocidos de la muestra “pool”.
Al tubo marcado con “K” se le agrega una gota de glóbulos rojos conocidos de la muestra “kell”.
A los tubos marcados TS, TB y TC, se les agrega una gota de los glóbulos rojos del paciente suspendidos en...
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