Practicas De Bioquimica

INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA

MANUAL DE LABORATORIO DE BIOQUÍMICA FUNDAMENTAL

3a EDICIÓN

MÉXICO, D.F.

2013

PROFESORES DE LA ACADEMIA DE BIOQUÍMICA FUNDAMENTAL

DR. CARLOS WONG BAEZA

QFI. ROCÍO DEL CARMEN GUZMÁN IBARRA.

M. en C. PEDRO ANTONIO LOYOLA ABITIA.

DRA. DORIS NERI CORTÉS.

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA FUNDAMENTALNombre: Boleta: Grupo: Carrera: Profesores:

ÍNDICE Reglamento del laboratorio. Práctica No. 1 Propiedades de los aminoácidos y proteínas Práctica No.2 Cinética enzimática Curva Tipo de azúcares reductores Efecto de la temperatura Efecto del pH Efecto de la concentración del sustrato Inhibición Enzimática Práctica No.3 Reacciones de carbohidratos Práctica No. 4 Reacciones enzimáticas deóxido-reducción I) Deshidrogenasa láctica II) Determinación de la deshidrogenasa succínica III Determinación de citocromo c y citocromo oxidasa Práctica No. 5 Aislamiento del DNA de chícharo/haba y su caracterización espectrofotométrica 5 7 15 19 21 24 27 29 33 40 43 44 45

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APÉNDICE I: Medidas generales de seguridad en el laboratorio. APENDICE II: Características y cuidados en el manejo de los reactivosQuímicos tóxicos empleados en el laboratorio

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REGLAMENTO DEL LABORATORIO DEL CURSO TEORICO PRACTICO DE BIOQUÍMICA FUNDAMENTAL

1. En la primera semana del curso, cada alumno deberá traer una fotografía para su hoja de control de asistencia. 2. Los cursos de laboratorio son para que los alumnos adquieran práctica y habilidad para desarrollar trabajo experimental, por lo tanto, laasistencia es obligatoria. 3. El alumno que falte a una sesión de laboratorio, tendrá una calificación de cero en la sesión correspondiente. 4. Las prácticas se iniciarán y se pasará lista a la hora indicada en los horarios, con una tolerancia de 10 minutos a la entrada; no habrá retardos y se pondrá falta a quien no llegue a la hora. 5. Todos los datos e información referente a las prácticas que sedesarrollarán en el curso están contenidas en el instructivo de laboratorio, por lo que el alumno deberá traerlo a cada sesión de laboratorio a la que asista. 6. Para el trabajo de laboratorio es indispensable traer bata, un lienzo de franela, un marcador indeleble, papel higiénico, escobillón para tubos de ensayo, detergente, y "masking-tape". 7. Durante el desarrollo de la práctica, quedaestrictamente prohibida la entrada de personas ajenas al grupo. 8. Los laboratorios son un lugar de trabajo, por lo que se que se deberá guardar el comportamiento adecuado. 9. Al finalizar el trabajo experimental el alumno deberá apagar y desconectar los aparatos eléctricos, entregar su material limpio, depositar su basura en su lugar y dejar limpia su área de trabajo. 10.Queda estrictamente prohibidosentarse en las mesas de trabajo.

11. Por razones de seguridad, queda estrictamente prohibido fumar o comer dentro del laboratorio. 12. El material de laboratorio roto, deteriorado o extraviado por los alumnos, deberá reponerse, sin excusa por el responsable directo o por el equipo de personas que efectúen la práctica. 13. El informe de las prácticas de laboratorio deberá hacerse por equipo en hojasblancas tamaño carta siguiendo las instrucciones del manual. 14. Los informes se entregarán una semana después de terminada cada práctica o en fecha previamente establecida por el profesor y al momento de pasar lista. Pasada esta fecha, ya no se recibirán informes.

PRÁCTICA No. 1
PROPIEDADES DE LOS AMINOÁCIDOS Y DE LAS PROTEÍNAS

INTRODUCCIÓN. Las proteínas son polímeros de alto peso molecular,compuestos por aminoácidos unidos entre sí por enlaces peptídicos, que en soluciones acuosas se comportan como coloides. Presentan propiedades químicas y físicas que dependen directamente de factores intrínsecos del propio polímero, como son su estructura y composición de aminoácidos, o bien de factores extrínsecos, como pueden ser el pH, la temperatura, la presencia de sales, etc. Existen...