Practicas de inmunologia

Practica 1
Tipificación sanguínea y factor Rh

OBJETIVO:
Determinar el grupo sanguíneo y el factor RH de una muestra de sangre problema, por el método en placa.

Fundamento:
La tipificación sanguínea se basa en la reacción que se efectúa entre los anticuerpos multivalentes (suero) y las partículas de antígeno (en eritrocitos); ya que se forman complejos antígeno-anticuerpo insolubles,que pueden ser visibles.

REACTIVOS Y MATERIALES:
Antisuero anti A
Antisuero anti B
Antisuero anti AB
Antisuero anti D
Lanceta estéril desechable
Torundas con alcohol
Aplicadores de madera
Placa de porcelana excavada

Método:
1.- Friccionar con la torunda la yema de uno de los dedos de la mano.
2.- Con una lanceta desechable estéril, practicar una incisión de 3 mm de profundidad.
3.-Colocar en una placa de porcelana, una gota de sangre en cada una de las cuatro excavaciones.
4.- Enseguida agregar: una gota de suero anti a en la primera excavación, una gota de suero anti b en la segunda excavación, una gota de suero anti ab en la tercera excavación y una gota de suero anti d en la cuarta excavación.
5.- Se mezcla bien con aplicadores diferentes. Enseguida se muevesuavemente la placa, durante 1 minuto en forma circular.
6.- Registrar los resultados con el signo (+) si hay aglutinación y si no la hay con el signo (-).
Resultados: “o” Rh positivo.
Conclusión:
Esta prueba es segura y fácil de hacer. Con ella podemos saber el tipo de sangre que tenemos y el factor (si es positiva o negativa).

Bibliografía:
Entrevista con Carles Lalueza-Fox sobre el gruposanguíneo neandertal, Mundo Neandert.
Bungen, Mario. La Investigación Científica. Ed. Ariel. Barcelona. 3ª. Ed. 1973.
HealthSystem.Virginia.edu (La herencia de los grupos sanguíneos)

Practica 2
Tipificación en tubo
OBJETIVO:
Determinar el grupo sanguíneo (ABO) y el factor Rh de una muestra de sangre problema, por el método en tubo.
FUNDAMENTO:
La tipificación sanguínea se basa en la reacciónque se efectúa entre el suero y las partículas de antígeno en GR, ya que se forman complejos Ag- Ac insoluble.
REACTIVOS Y MATERIALES:
Suero anti A
Suero anti B
Suero anti AB
Suero anti D
Albúmina bovina al 22%
Solución salina isotónica
Equipo de extracción
Tubos de ensayo
Pipeta graduada de 1 ml
Suspensión salina al 5% de GR tipo A, B y O

Método:
1.- Obtener el suero de lamuestra.
2.-Recoger una cantidad suficiente de GR y colocarlos en un tubo, agregar SSI y centrifugar por 3 minutos.
3.-Eliminar el sobrenadante y preparar una suspensión de GR al 5% en SSI (tomar 0.2 ml de GR y 3.8 ml de SSI) e identificar.
4.- Enumerar 7 tubos y hacer lo siguiente:
5.- Mezclar el contenido de los tubos, agitando la gradilla.
6.- Dejar reposar 3 minutos y enseguida centrifugar 1minuto a 1500 RPM y colocar los tubos en la gradilla.
7.- Tomar tubo por tubo y redispersar la suspensión de GR, golpeando ligeramente los tubos.
8.- Comprobar la presencia de aglutinación e interpretar los resultados.
9.- Si el tubo7 no presenta aglutinación, hacer lo siguiente:
10.- Añadir 2 gotas de albúmina bovina al 22% e incubar a 37ºC durante 15 minutos. Comprobar la presencia deaglutinación.

Resultado:
Hubo aglutinación en los tubos 4,5 y 7

Conclusión:
Esta práctica al igual que la anterior nos sirve para identificar el grupo sanguíneo de cada persona y el factor Rh que tiene esta. Solo que esta prueba requiere de más tiempo porque son muchos tubos. El procedimiento es más largo pero la práctica es más segura.
Practica 3
Prueba de coombs directa

OBJETIVO:Identificar gammaglobulinas u otras proteínas del suero que están adheridos a los GR, de una muestra problema.

Fundamento:
Los eritrocitos recubiertos con gammaglobulinas reaccionan con el suero de coombs, formando una red de hemaglutinación que es visible.

Reactivos y materiales:
Suero de coombs
Equipo de extracción
Solución salina isotónica
EDTA
Tubo de ensayo
Pipetas graduadas de...