Practicas de laboratorio

Practica No. 1
Frotis longitudinal, transversal de muestra de pacientes con Dx confirmado de leucemias con tinción de Wright.

Fundamento:
El examen microscópico de una extensión de sangre sobre un porta o cubreobjetos de vidrio, nos permite obtener valiosa información acerca de los elementos formes de la sangre, muchos de los cuales no pueden ser evaluados mediante las medicionescualitativas realizadas por otros métodos. En general, en un frotis podemos evaluar lo siguiente:
Morfología eritrocitaria.
Concentración y distribución de la hemoglobina.
Inclusiones y artificios de los eritrocitos.
Morfología y recuento diferencial de los leucocitos.
Distribución de los eritrocitos.
Inclusiones y artificios de los leucocitos.
Morfología y apreciación cualitativa del número deplaquetas.
Artificios y agrupación de las plaquetas.

Objetivo:
Realizar correctamente los extendidos sanguíneos usando diferentes técnicas.
Seleccionar la técnica adecuada identificando sus ventajas y desventajas.

Generalidades:
Un frotis de sangre es un mecanismo científico que consiste en el extendido de una gota de sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con elfin de analizarla posteriormente.
Es más adecuado emplear sangre que aún no ha estado en contacto con el anticoagulante, pues este podría alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a deformar las células de la sangre).
Su arquitectura de las células al formarse en la médula ósea.
Las alteraciones singulares en la forma de las células, que son una identificación especifican de algunasenfermedades. Algún indicador de los efectos nocivos de la quimioterapia y de la radioterapia. La diferenciación y recuento de los elementos celulares de la sangre. La fidelidad de la información obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las extensiones.
Estas no deben ser demasiado gruesas porque las células se amontonarían y no podrían ser reconocidas, ni diferenciarse, nidemasiado delgadas porque las células se deformarían, distorsionarían y destruirían. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados y para obtener buenos resultados es necesario que:
Tanto portaobjetos como cubreobjetos deben estar bien limpios y desengrasados (preferentemente nuevos). La gota de sangre usada para la preparación del frotis no debe ser muy grande ni pequeña, de preferencia deltamaño de la cabeza de un alfiler (entre 2 y 3 mm), obtenida por punción capilar.
La sangre no haya estado en contacto con anticoagulante, pues podría deformarse la morfología celular si pasase esto.
La lectura de las extensiones se hará en las zonas donde los eritrocitos "casi se tocan".
Para llevar a cabo las extensiones en portaobjeto se coloca una gota de sangre de 3 a 4mm de diámetro, aunos 2 o 3 cm de uno de los extremos del portaobjetos este se coloca en una superficie plana y lisa. Con el borde de otro portaobjeto, con el que se toca la gota de sangre, la cual se desliza por capilaridad a todo lo largo del canto de dicho portaobjeto y con un movimiento rápido y uniforme, en un ángulo de 45 grados se desliza el portaobjetos dejando una capa de sangre en la superficie del otro.El espesor del extendido debe ser delgado.



Material:
Sangre venosa obtenida con E.D.T.A
Portaobjetos.

Frotis longitudinal:
Son similares a los anteriores, con la ventaja que la distribución de las células es homogénea.
1. Colocar una gota de sangre de 2 a 3mm de diámetro en la parte media y cerca del extremo largo de un portaobjetos mantenerlo en posición horizontal sujetándolo conlos dedos índice y pulgar de manera que se forma un puente, con estos dedos sobre el portaobjetos.
2. Se coloca un segundo portaobjetos haciendo un ángulo de 30o con el primero y con su mayor eje mayor perpendicular al portaobjetos horizontal, quedando la gota de sangre debajo de él y apoyándolo firmemente. Se desliza el extensor hasta hacer contacto con la sangre, la que difunde uniformemente...