Practicas de laboratorio

PRACTICA #7 : BILIRRUBINA TOTAL Y BILIRRUBINA DIRECTA

Fundamento.

La mayoría de los procedimientos clínicos de rutina para la determinación de bilirrubina serica, están basados en la clásica reacción Diazo de Ehrlich.

Cuando una solución de acido sulfonilico en acido clorhídrico diluido es combinada con nitrato de sodio se forma acido nitroso. Este acido inestable, el cual debe serpreparado en el momento del ensayo, reacciona para formar acido sulfanilico diaztizado. Se acopla con la bilirrubina para producir azobilirrubina, la intensidad de color de este es proporcional a la concentración de bilirrubina.

Material y Equipo:

• Gradilla con tubo de ensaye

• Jeringa desechable con aguja color verde

• Algodón

• Alcohol

• Guantes

•Marcador

Material Biológico:

Suero o plasma

Procedimiento de Bilirrubina Total:

1.- Coloque en los tubos los siguientes volúmenes y mezcle bien:

| |BR |C |BM |M |
|Reactivo |1.0 ml |1.0 ml |1.0 ml|1.0 ml |
|Oxidante |1 |1 | | |
|Agua |0.05 ml | | | |
|Calibrador | |0.05 ml| | |
|Muestra | | |0.05 ml |0.05 ml |

2.- Poner que los tubos se incuben a temperatura ambiente por lo menos 3 minutos.

3.- Ajustar a cero el espectofotometro a 540 nm con el reactivo.

4.- Leer a 540 nm.

Procedimiento deBilirrubina Directa:

1.- Coloque en los tubos los siguientes volúmenes y mezcle bien:

| |BR |C |BM |M |
|Reactivo |1.0 ml |1.0 ml |1.0 ml |1.0 ml |
|Oxidante|1 |1 | |1 |
|Agua |0.1 ml | | | |
|Calibrador | |0.1 ml | | ||Muestra | | |0.1 ml |0.1 ml |

2.- Poner que los tubos se incuben a temperatura ambiente por lo menos 5 minutos.

3.- Ajustar a cero el espectofotometro a 540 nm con el reactivo.

4.- Leer a 540 nm.

REPORTE PRACTICA #7 : BILIRRUBINA TOTAL Y BILIRRUBINA DIRECTA

1.-Se colocaron enlos tubos los siguientes volúmenes y se mezclo bien:

| |BR |C |BM |M |
|Reactivo |1.0 ml |1.0 ml |1.0 ml |1.0 ml |
|Oxidante |1 |1| | |
|Agua |0.05 ml | | | |
|Calibrador | |0.05 ml | | |
|Muestra |...