Practicas de presencia enzimática y su actividad

Practicas de presencia enzimática y su actividad
Resumen
Durante esta práctica se da realiza el estudio de las enzimas en las células animales, en este caso específicamente de la catalasa, la cual es una proteína que se encuentra abundantemente en el hígado y es por eso que se utiliza durante todos los experimentos a realizar. Además se utiliza también el peróxido de hidrogeno asemejando elmetabolismo de la célula y el desecho que esta produce comprendiendo también su gran importancia. Se estudian las enzimas y su actividad, los factores que afectan la velocidad de reacción de la enzima, tales como el pH, temperatura, y por último la presencia de inhibidores en las actividades de la enzima.
Antecedentes
El peróxido de hidrogeno tiene un papel vital en el organismo, y es esencialpara el metabolismo de carbohidratos, grasas, vitaminas, diferentes nutrientes y proteínas. El metabolismo incluye todas las reacciones químicas que ocurren en los seres vivos y la mayoría de veces son controladas por las enzimas.
(Audesirk, et al)
Las enzimas son catalizadores específicos y potentes que posibilitan la coexistencia de muchas reacciones dentro de la célula, en su mayoría siendo denaturaleza proteica. Alcanzan grandes velocidades gracias a diferentes factores, tales como el pH y la temperatura de la misma célula.
(Lodish, et al)
Un inhibidor, es una sustancia que interfiere el trabajo de una enzima y hace más lenta su reacción. Existen dos tipos, reversible e irreversible. La primera se une a la enzima y después de ser liberado deja a la enzima en su condición original.Mientras que la irreversible reacciona con la enzima para producir una proteína que no tiene actividad enzimática y por lo tanto es imposible regenerar la enzima original.
(Campbell, et. Al.)
La catalasa es una enzima que descompone el peróxido de hidrogeno en agua y oxigeno. Químicamente es una hemoproteina se estructura terciaria. Debido a que el peróxido de hidrogeno es uno de los productosfinales de oxidación del metabolismo, la acumulación es letal para la célula, por lo que la catalasa cumple una función muy importante.
(Winn, et. Al.)
Objetivos
Identificar las proteínas en célula animal
Revelar la catalasa en el hígado
Metodología
Se echa 2 ml de H202 en tubo de ensayo 1 y se agrega un pedazo pequeño de hígado fresco. Se observan y anotan los resultados.
Se toma este mismotubo y se vierte solamente el liquido en tubo numero 2, se observan los resultados. Se agrega en este tubo otro pedazo de hígado y observa.
Luego se agregan 20 gotas de H2O2 al hígado que está en el tubo 1, se observan los resultados. Para continuar tire nuevamente el líquido y agregue más H2O2 y observe.
Se tritura en un mortero un pedazo de hígado y luego se transfiere al tubo 3 con 2 ml deH2O2 y observe los resultados.
Hierva un pedazo pequeño de hígado y colóquelo en otro tubo de ensayo junto con 2 ml de H2O2.
Para finalizar se utilizaran 3 tubos de ensayo mas, numérelos y realice lo siguiente: En el tubo 1 agregue HCL y agitando has alcanzar pH 2. En el tubo 2 agregue NaOh gota a gota y agitando hasta alcanzar pH 10. En el tercer y último tubo agregue HCl o NaOH agitandotambién. Para ver los pH se necesitara las tiras medidoras de pH. Luego eche un pedazo de hígado en cada tubo y observe la reacción.
Resultados
A. Actividad enzimática

Tubo 1
Tubo 2
Tubo 3
Descripción
2 ml de H2O2 con pedazo de hígado
Liquido resultante del tubo anterior mas otro pedazo de hígado
2 ml de H2O2 con pedazo de hígado triturado
Resultado
Se produjo espuma y el hígado se volviócafé claro. Cuando se saca el liquido y vuelve a agregar H2O2 se vuelve a producir espuma
Ya no se produce espuma, no reacciona.
Se produce espuma más rápido, es decir reacciona más deprisa debido a que se extendió la superficie de reacción

B. Factores que afectan actividad enzimática

Tubo 4
Descripción
Pedazo de hígado hervido junto con 2 ml de H2O2 en tubo de ensayo
Resultado
El...