practicas fisiologia animal

Trabajo Práctico Optativo
Extracción de ADN y condensación
alcohólica.
B101
Biología General
INTRODUCCION
El ácido desoxirribonucleico es un tipo de ácido nucleico, una macromolécula
que forma parte de todas las células. Contiene la información genética usada
en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y de
algunos virus, y es responsable de su transmisiónhereditaria.
Muchas de las técnicas de biología molecular incluyen algún tipo de
manipulación del material genético. Hoy día podemos obtener suficiente ADN y
de buena calidad de manera sencilla y en poco tiempo.
Algunas preguntas para pensar acerca del trabajo práctico…
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Una manera de purificar una molécula es deshacerse de todas las
moléculas, excepto la de interés. Si queremos extraerADN de una fruta
como kiwi ¿De que moléculas piensas que deberíamos deshacernos?
¿Qué sustancias son necesarios para lograr purificar ADN de acuerdo a
sus propiedades químicas y la de las demás moléculas?

HISTORIA DEL DESCUBRIMIENTO DEL ADN
El ADN lo aisló por primera vez en 1869, el médico suizo Friedrich Miescher.
Miescher realizaba experimentos acerca de la composición química del pusde
vendas quirúrgicas desechadas, cuando notó un precipitado de una sustancia
desconocida que caracterizó químicamente más tarde. La llamó nucleína,
debido a que lo había extraído a partir de núcleos celulares. Se necesitaron
casi 70 años de investigación para poder identificar los componentes y la
estructura de los ácidos nucleicos.
En 1930 Levene y su maestro Albrecht Kossel probaron quela nucleína de
Miescher es un ácido desoxirribonucleico (ADN) formado por cuatro bases
nitrogenadas, el azúcar desoxirribosa y un grupo fosfato, y que, en su
estructura básica, el nucleótido está compuesto por un azúcar unido a la base y
al fosfato. Sin embargo, Levene pensaba que la cadena era corta y que las
bases se repetían en un orden fijo.
La función biológica del ADN comenzó adilucidarse en 1928, con una serie
básica de experimentos realizados por Frederick Griffith, quien estaba
trabajando con cepas "lisas" (S) o "rugosas" (R) de la bacteria Pneumococcus
(causante de la neumonía), según la presencia (S) o no (R) de una cápsula
azucarada, que es la que confiere virulencia. La inyección de neumococos S

vivos en ratones produce la muerte de éstos, y Griffith observóque, si
inyectaba ratones con neumococos R vivos o con neumococos S muertos por
calor, los ratones no morían. Sin embargo, si inyectaba a la vez neumococos R
vivos y neumococos S muertos, los ratones morían, y en su sangre se podían
aislar neumococos S vivos. Como las bacterias muertas no pudieron haberse
multiplicado dentro del ratón, Griffith razonó que debía producirse algún tipo decambio o transformación de un tipo bacteriano a otro por medio de una
transferencia de alguna sustancia activa, que denominó p r i n c i p i o
transformante. Esta sustancia proporcionaba la capacidad a los neumococos R
de producir una cápsula azucarada y transformarse así en virulentas.

Curtis H & Barnes NS (2001) Biología. (6° edición). Ed. Médica Panamericana

La búsqueda del «factortransformante» que era capaz de hacer virulentas a
cepas que inicialmente no lo eran continuó hasta 1944, año en el cual Oswald
Avery, Colin MacLeod y Maclyn McCarty extrajeron la fracción activa (el factor
transformante) y, mediante análisis químicos, enzimáticos y serológicos,
observaron que no contenía proteínas, ni lípidos, ni polisacáridos activos, sino
que estaba constituido principalmentepor "una forma viscosa de ácido
desoxirribonucleico altamente polimerizado", es decir, ADN.
Finalmente, el papel exclusivo del ADN en la heredabilidad fue confirmado en
1952 mediante los experimentos de Alfred Hershey y Martha Chase, en los
cuales comprobaron que el fago T2 (virus que infecta bacterias) transmitía su
información genética en su ADN, pero no en su proteína. El fago consiste...