practicas

Páginas: 3 (508 palabras) Publicado: 30 de octubre de 2014
AISLAMIENTO DEL ADN INTRODUCCIN El aislamiento del ADN es el principio de muchos mtodos usados en la ingeniera gentica, como la transformacin, secuenciacin, mapeo fsico, mutagnesis sitio dirigidas,etc. El aislamiento de los cidos nucleicos implica la destruccin de la clula por choque osmtico homogeneizacin, digestin enzimtica o tratamiento mecnico suave. OBJETIVO El alumno aislar y observaraal ADN extrado de forma rudimentaria. Materiales de laboratorio por equipoMaterial del alumno por equipo1 Mortero y pistiloMuestra vegetal (ajo, cebolla, planta, jitomate)4 Tubo de ensayoSal de mesa1Pipeta de 10 mlBicarbonato de sodio1 pipeta PasteurDetergente lquido o champTubos para centrifugapalillosMateriales de laboratorio por grupoAlcohol isoamlico a 0CCentrfuga Agua destilada1 bandeja demetalhielo ACTIVIDAD DE LA PRACTICA Preparar el tampn con los siguientes ingredientes y mantener en la nevera o en un bao de hielo triturado 120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral.No usar agua del grifo. 1,5 g de sal de mesa, preferiblemente pura. 5 g de bicarbonato sdico. 5 ml de detergente lquido o champ. Elegir la muestra que va a proporcionar el ADN entre los vegetalesque pueda haber en la cocina (cebolla, ajo, tomates, etc.) y cortarla en cuadraditos. Triturar la muestra con un poco de agua en la batidora accionando las cuchillas a impulsos de 10 segundos. As serompern muchas clulas y otras quedarn expuestas a la accin del detergente. Mezclar en un recipiente limpio 5 ml del triturado celular con 10 ml del tampn fro y agitar vigorosamente durante al menos 2minutos. Separar despus los restos vegetales ms grandes del caldo molecular hacindolo pasar por un colador lo ms fino posible. Lo ideal es centrifugar a baja velocidad 5 minutos y despus pipetear elsobrenadante. Retirar 5 ml del caldo molecular a un tubo de ensayo y aadir con pipeta 10 ml de alcohol isoamlico enfriado a 0C. Se debe dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del...
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