Practico 4
Páginas: 5 (1014 palabras)
Publicado: 28 de octubre de 2010
Laboratorio de Bioquímica 2º Semestre 2010
Enfermería
PRÁCTICO Nº 4 PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS CARBOHIDRATOS. 1. INTRODUCCIÓN Los hidratos de carbono, también llamados azúcares, glúsidos o sacáridos, son un grupo de biomoléculas cuya característica química principal es su naturaleza polihidroxílica con otra función más oxidada, el grupo carbonilo de aldehídos y cetonas. En estas funcionesse centra su reactividad. En la práctica se realizan algunos ensayos colorimétricos que pueden ayudar a clasificar e, incluso, a identificar a un determinado azúcar entre varios posibles. El principal problema es la sensibilidad de alguno de ellos, que lo a hacen poco útiles en muestras muy diluidas. Así, la orina normal contiene cantidades muy pequeñas de azúcares, que no pueden detectarse porestos ensayos. Sólo en caso de osuna (eliminación de azúcares en orina en cantidades anormalmente altas) pueden ser válidos para verificar e identificar la presencia de alguno de ellos. Aunque en la actualidad no son usualmente empleados en los laboratorios clínicos automatizados, se incluyen por su carácter pedagógico. Los monosacáridos, en caliente y medio sulfúrico concentrado, sufren unadeshidratación que conduce a un anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfufural, según se parta de pentosa o hexosa.
En el caso de oligo- y polisacáridos, estas reacciones son también válidas porque el medio ácido produce una hidrólisis previa del enlace glicosídico.
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Los furfurales normales se conjugan fácilmente con diversos fenolesy aminas, dando reacciones coloreadas como las descritas a continuación. 2. PARTE EXPERIMENTAL. A. PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS. Actividad Nº 1: Prueba de Molish. 1.1 Fundamento. El ácido sulfúrico concentrado hidroliza enlaces para dar monosacáridos que pueden ser luego deshidratados dando furfural y sus derivados. Estos productos se combinan con a – naftol sulfonato originado un complejopúrpura. Esta reacción es general para los hidratos de carbono pero algunos otros compuestos orgánicos dan también furfural con ácido sulfúrico concentrado. Materiales. Ácido Sulfúrico (c) a-naftol (50 g/L en etanol) Muestra problema (azúcares) Método. Agregue dos gotas de la solución de a-naftol a 2 mL de la sustancia problema. Añada cuidadosamente por las paredes del tubo aproximadamente 1 mLde H2SO4 concentrado has que se formen dos capas. Observe cuidadosamente cualquier cambio de color en la interface de los dos líquidos. Repita el procedimiento, usando agua en vez de la solución de carbohidrato. B. REACCIONES DE LOS AZÚCARES REDUCTORES. ACTIVIDAD Nº 2: Prueba de Barfoed. 2.1 Fundamento. El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y solamente puede ser reducido por monosacáridos. Sise deja hervir por largo tiempo existe la posibilidad de hidrolizar disacáridos dando así reacciones falsamente positivas. Se recomienda dejar el tubo hasta que el precipitado sedimente, debido a que éste es poco denso. El color del óxido cuproso es también diferente, tendiendo más a rojo ladrillo. 2.2 Materiales. Reactivo de Barfoed. Muestra problema (azúcares) 2.3 Método. A 2 mL del reactivo deBarfoed añada 1 mL de la solución problema.
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Hierva por 1 minuto y deje reposar. ACTIVIDAD Nº 3: Prueba de Fehling. 3.1 Fundamento. Los monosacáridos y la mayoría de los disacáridos poseen poder reductor, que deben al grupo carbonilo que tienen en su molécula. Este carácter reductor puede ponerse de manifiesto por medio de una reacciónredox llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II). Las soluciones de sal tienen color azul. Tras la reacción con el glúsido reductor se forma óxido de cobre (I) de color rojo. De este modo, el cambio indica que se ha producido la citada reacción y que, por lo tanto, el glúsido presente es reductor. 3.2 Materiales. Reactivos de Fehling A y B. Muestra Problema (Azúcares) 3.3 Métodos....
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PRÁCTICO Nº 4 PROPIEDADES QUÍMICAS DE LOS CARBOHIDRATOS. 1. INTRODUCCIÓN Los hidratos de carbono, también llamados azúcares, glúsidos o sacáridos, son un grupo de biomoléculas cuya característica química principal es su naturaleza polihidroxílica con otra función más oxidada, el grupo carbonilo de aldehídos y cetonas. En estas funcionesse centra su reactividad. En la práctica se realizan algunos ensayos colorimétricos que pueden ayudar a clasificar e, incluso, a identificar a un determinado azúcar entre varios posibles. El principal problema es la sensibilidad de alguno de ellos, que lo a hacen poco útiles en muestras muy diluidas. Así, la orina normal contiene cantidades muy pequeñas de azúcares, que no pueden detectarse porestos ensayos. Sólo en caso de osuna (eliminación de azúcares en orina en cantidades anormalmente altas) pueden ser válidos para verificar e identificar la presencia de alguno de ellos. Aunque en la actualidad no son usualmente empleados en los laboratorios clínicos automatizados, se incluyen por su carácter pedagógico. Los monosacáridos, en caliente y medio sulfúrico concentrado, sufren unadeshidratación que conduce a un anillo pentagonal de furfural o hidroximetilfufural, según se parta de pentosa o hexosa.
En el caso de oligo- y polisacáridos, estas reacciones son también válidas porque el medio ácido produce una hidrólisis previa del enlace glicosídico.
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Los furfurales normales se conjugan fácilmente con diversos fenolesy aminas, dando reacciones coloreadas como las descritas a continuación. 2. PARTE EXPERIMENTAL. A. PRUEBAS GENERALES PARA CARBOHIDRATOS. Actividad Nº 1: Prueba de Molish. 1.1 Fundamento. El ácido sulfúrico concentrado hidroliza enlaces para dar monosacáridos que pueden ser luego deshidratados dando furfural y sus derivados. Estos productos se combinan con a – naftol sulfonato originado un complejopúrpura. Esta reacción es general para los hidratos de carbono pero algunos otros compuestos orgánicos dan también furfural con ácido sulfúrico concentrado. Materiales. Ácido Sulfúrico (c) a-naftol (50 g/L en etanol) Muestra problema (azúcares) Método. Agregue dos gotas de la solución de a-naftol a 2 mL de la sustancia problema. Añada cuidadosamente por las paredes del tubo aproximadamente 1 mLde H2SO4 concentrado has que se formen dos capas. Observe cuidadosamente cualquier cambio de color en la interface de los dos líquidos. Repita el procedimiento, usando agua en vez de la solución de carbohidrato. B. REACCIONES DE LOS AZÚCARES REDUCTORES. ACTIVIDAD Nº 2: Prueba de Barfoed. 2.1 Fundamento. El reactivo de Barfoed es débilmente ácido y solamente puede ser reducido por monosacáridos. Sise deja hervir por largo tiempo existe la posibilidad de hidrolizar disacáridos dando así reacciones falsamente positivas. Se recomienda dejar el tubo hasta que el precipitado sedimente, debido a que éste es poco denso. El color del óxido cuproso es también diferente, tendiendo más a rojo ladrillo. 2.2 Materiales. Reactivo de Barfoed. Muestra problema (azúcares) 2.3 Método. A 2 mL del reactivo deBarfoed añada 1 mL de la solución problema.
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