Precipitación, Separación Y Punto Isoeléctrico De Proteínas

Instituto Politécnico Nacional- Escuela Nacional de Ciencias Biológicas
Ingeniería Bioquímica
Laboratorio de Bioquímica y Biología Molecular
PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DEPROTEÍNAS

INTRODUCCION
Una proteína tiene múltiples grupos acido-base, lo que hace sus propiedades de solubilidad dependiente de la concentración de sal, polaridad del solvente, pH, y temperatura.Diferentes proteínas tiene diferentes propiedades de solubilidad, por lo que cuando una proteína es soluble otras precipitan.

Solventes Orgánicos  
El uso de solventes orgánicos miscibles con elagua, tales como acetona y etanol, actúan como buenos precipitantes de de proteínas, ya que tienen menor poder de disolver estas proteínas, normalmente se utilizan abajas temperaturas (0ºC), ya que atemperaturas mayores la proteínas tienden a desnaturalizarse.

Efectos De La Concentración De Sales
La solubilidad de una proteína es sensible a la concentración de sal. La solubilidad de unaproteína a baja fuerza iónica generalmente aumenta con la concentración de sal. El salting in es el fenómeno por el cual la concentración de sal aumenta la solubilidad de la proteína. A altas fuerzasiónicas, la solubilidad de la proteínas disminuye,. Este fenómeno se da básicamente por la competencia por las moléculas de agua que forman parte de la capa de solvatación
| BIURET |INTERPRETACIÓN |
FILTRADO 1 | Positiva | Hay presencia de proteínas |
PRECIPITADO 1 | Positiva | Hay presencia de proteínas |
FILTRADO 2 | Negativa | No hay presencia de proteinas |
PRECIPITADO 2 |positiva | Hay presencia de proteínas |









Efectos De pH  
Las proteínas generalmente tiene muchos grupos ionizables, los que tienen una variedad de pK. Cada proteína tiene un pHcaracterístico al cual las cargas posivitivas se encuentran en igual cantidad a las cargas negativas, a este pH se conoce como punto isoeléctrico, pI, el cual puede ser conocido a través del...