PRECIPITACI N 12

PRECIPITACIÓN, SEPARACIÓN Y PUNTO ISOELÉCTRICO DEPROTEÍNAS
Sección 3 3FV2
CORONADO ESCOTO DANIEL
ISRAEL RAMOS COLIN
OBJETIVO
Identificar las diferentes reacciones donde nuestra proteína y quecomportamiento presenta ante los diferentes factores que afectan nuestra solubilidad d la proteína y purificar proteínas.
RESULTADOS.
RESULTADOS DE SALTING-OUT

Biuret
Interpretación
Filtrado 1
Pruebapositiva
Coloración violeta
Precipitado1
Prueba positiva
Coloración violeta
Filtrado2
Prueba negativa
Coloración azul
Precipitado2
Prueba negativa
Coloración azul

RESULTADOS DE PRECIPITACION POREFECTO DEL pH Y SOLVENTES
Tubo No
1
2
3
Clara de huevo
3.0
3.0
3.0
HCL
1.0 precipitado moderado
-
-
NaOH

-
1.0
no precipito
-
Regulador acetatos 0.1 M pH 4.7de

-

-
1.0
Mayor precipitado


Al agregaretanol al 96°(ml)
HCL
No precipito
NaOH
No precipito
Regulador de acetatos
Mayor precipitación blanquizca

PRESIPITACION POR METALES PESADOS
Tubo No
1
2
3
4
5
6
Clara de huevo filtrada
1.0
1.0
1.01.0
1.0
1.0
HgCL2
5%
0.25
-




AgNO3
2%

0.25




Pb(CH3COO)2
5%


0.25



BaCL2
5%



0.25


NaCL
5%




0.25

Agua






0.25

Observaciones
Tubo 1- Precipitado lechoso.
Tubo 2-Precipitadoblanco.
Tubo 3- Precipitado lechoso.
Tubo 4- no precipito hasta después de 5 minutos
Tubo 5- surgió una reacción de saltyng in
Tubo 6- no precipito

DETERMINACION DE PUNTO ISOELECTRICO DE LA INSULINATubo No.
CH3COOH
0.2 M
CH3COONa
0.2 M
Insulina
40 U/mL
pH
Observaciones
1
O.23
0.02
6 U
(0.06,L)


2
0.15
0.10
6 U
(0.06,L


3
0.05
0.20
6 U
(0.06,L


4
0.01
0.24
6 U
(0.06,L


5
0.00
0.25
6 U(0.06,L



Calculo del pH:
El cálculo del pH de cada una de nuestras muestras e realiza mediante la siguiente formula (1):
pH= pKa + log ([SC])/([HA])
Ejemplo
Muestra 1
Sabemos que el pKa=4.76 y elvol. de CH3COOH =0.23 que va a ser nuestra (HA) acido debil y del CH3COONa =0.02 al aplicar la formula
pH=4.75+log⁡

pH=4.75+log⁡



DISCUSIÓN DE RESULTADOS
En la primera parte de precipitación con...