PRECIPITACI N DE GAMMAGLOBULINA CON SULFATO DE AMONIO


UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NUEVO LEÓN
FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS


DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA CELULAR E INMUNOLOGÍA


inmunología

Dr. edgar mendoza gamboa.
dr. leonardo castillo león.


PrácticaNo. 3
PRECIPITACIÓN DE GAMMAGLOBULINA CON SULFATO DE AMONIO.




Nombre: Gabriela Aimee Salazar Mata.
Carrera: Licenciatura en Biotecnología Genómica.
Grupo: 444.





Ciudad Universitaria, SanNicolás de los Garza, Nuevo León.
Marzo 4, 2015.
PRECIPITACIÓN DE GAMMAGLOBULINA CON SULFATO DE AMONIO (NH4)2SO4

Los anticuerpos, son proteínas elaboradas por todos los vertebrados en respuesta a unantígeno y que tienen la capacidad de reaccionar específicamente con él (Gómez et al., 1994).
Al realizar la separación de las proteínas séricas por electroforesis en acetato de celulosa, los anticuerpos selocalizan principalmente en la fracción gamma de las globulinas, por lo que reciben el nombre de gammaglobulinas (Gómez et al., 1994).
Los anticuerpos pueden separarse a partir de los “suerosinmunes” por precipitación con sulfato de amonio al 30-40% de saturación. La adición de sulfato de amonio a esta concentración a una muestra de suero, hace que los anticuerpos precipiten. Otras proteínasprecipitan con otras concentraciones de sulfato de amonio (Rojas-Espinosa, 2006).
El sulfato de amonio, altamente hidrofílico, interacciona con el agua y retira el agua de solvatación de las proteínas,promoviendo su agregación y precipitación. Los anticuerpos se liberan del sulfato de amonio por diálisis contra soluciones de baja concentración salina (Rojas-Espinosa, 2006).

MÉTODO DE LOWRY
Estesistema, utiliza tres sistemas para producir coloración por la presencia de proteínas. En el primer lugar, el Cu+ forma complejos de coordinación con dos enlaces peptídicos consecutivos de las proteínas,dando lugar a un compuesto coloreado azul. En segundo lugar, este compuesto es capaz de reducir al reactivo de Folin-Ciocalteu (ácido fosfotúngstico y fosfomolíbdico), dando un color más azulado....