Precipitación de proteinas

PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS
SALTING-OUT, Ph, TEMPERATURA

SOLUBILIZACIÓN Y PRECIPITACIÓN DE PROTEÍNAS POR SALADO.
Las sales neutras afectan la solubilidad de las proteínas globulares: a bajasconcentraciones, las sales incrementan la solubilidad de las proteínas ya que se induce la ionización de los grupos R disociables de la proteína. Por otra parte, conforme aumenta la fuerza iónica, sepuede precipitar una proteína ya que la concentración elevada de sales puede eliminar el agua de hidratación de las moléculas de proteína. El sulfato de amonio es usado frecuentemente para estepropósito.

MATERIALES Y EQUIPOS EMPLEADOS
• 1 Centrífuga
• Tubos de Centrífuga
• 1 Probeta
• Pipetas
• Vasos de Precipitados
• Tubos de Ensaye de 16x150
• 1 Varilla deVidrio

REACTIVOS
• Ácido acético 0.1N
• Sulfato de amonio saturado al 70%
• Sulfato de amonio sólido

PRECIPITACIÓN ISOELÉCTRICA.
Las proteínas muestran un mínimo de solubilidada su pH isoeléctrico, que es el valor de pH en el cual la proteína no posee carga eléctrica. En estas condiciones, no existe repulsión electrostática entre moléculas de proteínas vecinas y tienden acoalescer y precipitar. Cada proteína tiene un pI y estos van desde 1.5 hasta 11.0.
Los iones H+ y OH- del agua provocan efectos parecidos, pero además de afectar a la envoltura acuosa de lasproteínas también afectan a la carga eléctrica de los grupos ácidos y básicos de las cadenas laterales de los aminoácidos. Esta alteración de la carga superficial de las proteínas elimina lasinteracciones electrostáticas que estabilizan la estructura terciaria y a menudo provoca su precipitación.

MATERIALES Y EQUIPOS EMPLEADOS
• Pipetas
• Vasos de Precipitados
• 2 Buretas
• 1Soporte Universal
• 1 Pinzas para Bureta
• pHmetro

REACTIVOS
• HCl 0.2N
• NaOH 0.2N

EFECTO DE LA TEMPERATURA EN LA SOLUBILIDAD.
Entre los 0 y los 40 °C, la solubilidad de...