Preguntas Sustancia Gris

UNIVERSIDAD ATONOMA DE SINALOA. FACULTAD DE MEDICINA

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LABORATORIO DE BIOQUÍMICA MÉDICA

PRACTICA#2: DETERMINACIÓN DE COLINESTERASA EN SUERO
TITULAR: BLANCA ROSA NORIEGA ORTEGA
INST. CUAUHTÉMOC PÉREZ MARCOS

EQUIPO # 5:
* LEY GASTELUM LESLIE MARIA
* LOPEZ ANGULO CIELO AGLAE
* PARRA GALAVIZ MARLEN GPE.
*BOJORQUEZ RIVERA ENNIS ELAIN
* CAMBEROS VALDEZ IRMA STEPHANY

SECCION #1.
GRUPO: II-8

CULIACAN, SIN, VIERNES 09 MARZO DEL 2012

PRÁCTICA No. 2
DETERMINACIÓN DE COLINESTERASA EN SUERO
Objetivo del reporte
1. Definición, lugar de formación y reacción que cataliza la acetilcolinesterasa.
2. Explicar la liberación de acetilcolina en la unión neuromuscular.
3. Explicar el mecanismode acción de la acetilcolinesterasa en la unión neuromuscular.
4. Mencionar las causas más importantes por las que puede aumentar o disminuir la colinesterasa.
5. Proceso de contracción.
6. Miastenia Gravis (mencionarla).

Condiciones de la práctica
Dos alumnos donaran sangre 15 minutos antes de la práctica. De preferencia que proceda del campo.

Fundamento del método
Lacolinesterasa cataliza la hidrólisis de la bilirrubina en tiocolina y ácido butírico. La concentración catalítica se determina a partir de la velocidad de desaparición del hexacianoferrato (III), medida a 405 nm por medio de las siguientes reacciones.
Butirilticolina + H2O tiocolina + ácido butírico.
2 tiocolina + 2OH + 2 hexacianoferrato (III) + O2Ditiobis(colina) + 2 hexacianoferraton (II) + H2O

El izoenzima atípico de la colinesterasa (AA) puede ser estimada mediante el “número de dibucaína”, que indica el porcentaje de inhibición de la actividad enzimática en presencia de dubacaína.

Técnica
Pipetear en una cubeta:
1. Reactivo de trabao: 1.5 ml.
2. Suero: 0.025 ml.
3. Mezclar e insertar la cubeta en el espectrófonómetro.Poner el cronómetro en marcha.
4. Leer a 405 nm. A los 90 segundos leer absorvancia inicial y efectuar nuevas lecturas cada 30 segundos durante 90 segundos.
5. Calcular el incremento de la absorvancia por minuto promedio (A/min).
6.
Cálculos
U/I= 65 804 x A/minuto
Abs. Inicial | 2.712 |
Lectura 1 | 2.706 |
Lectura 2 | 2.708 |
Lectura 3 | 2.707 |
Promedio 0. 08 |65804 x 0.08 = 5264.32

Valores normales
Hombres: 4620 – 11 500 U/L.
Mujeres: 3930 – 10 800

Resultados
En una tubo de ensayo mezclamos el reactivo de trabajo, la acetilcolinesterasa de modo que quedara en las paredes del tubo , con 0.025 ml de suero, una vez mezclado, lo metimos al espectofotometro y tomamos las lecturas mencionadas anteriormente, y luego de un tiempo (90 seg)calculamos el incremento de absorvancia por min, de los cuales obtuvimos el siguiente resultado. 65804 x 0.08 = 5264.32

Conclusiones

Observaciones

PRÁCTICA 2
DETERMINACIÓN DE COLINESTERASA EN SUERO

1. DEFINICIÓN, LUGAR DE FORMACIÓN Y REACCIÓN QUE CATALIZA LA ACETILCOLINESTERASA.
El enlace entre ACh y su proteína receptora existe durante un breve insatante. El complejoACh-receptor se disocia con rapidez pero vuelve a formarse rápidamente en tanto que haya ACh libre en la vecindad. Para que la actividad en la célula postsináptica se suspenda, la ACh libre debe desactivarse muy pronto después de que se libera. La desactivación de ACh se logra por medio de una enzima llamada acetilcolinesterasa (AChE), presente en la membrana postsinaptica o inmediatamente fuera de lamembrana, con su sitio activo viendo hacia la hendidura sináptica. La AChE hidroliza la acetilcolina hacia acetato y colina, que después puede volver a entrar a las terminales de axón presinápticos y volver a sintetizarse hacia acetilcolina.
La acción de la acetilcolinesterasa en la membrana celular postsinaptica desactiva la acetilcolina liberada hacia la hendidura sináptica. Esto activa la...