Preparació de medis

Institut La Romànica CFGS: Laboratori d’anàlisi i control de qualitat MP06 Assajos microbiològics Nom: Abdelali El Bouchikhi Arrifi Exp: preparació de medis i sembres

Data: 25/11/10-2/12/10 Pàgina: 01/06 Nota:

Objectius     Aprendre a preparar la sessió pràctica Aprendre a preparar els diferents tipus de medis de cultiu. Condicionar el medi de cultiu preparat prèviament segons la sembraa realitzar. Assajar els diferents mètodes de sembra

Material i reactius

Material Vas de precipitats Ampolla Embut vidre de rellotge balança

Preparació de medis Reactius Agar Nutrient Aigua destil·lada

Sembres 1 tub d’assaig amb 10mL d’aigua de triptona 1 tub d’assaig amb 10mL de brou McConkey 1 tub d’assaig amb 10mL d’agar TSA 1 tub d’assaig amb 10mL d’agar Kigler 1 tub d’aigua amb10mL de colorant 4 plaques de petri 1 tub d’assaig amb 15mL d’agar TSA 1 ampolla de TSA 1 gradeta 1 bany maria 1 nansa de Kolle rodona 1 nansa de Kolle recta 1 nansa de digralski

CFGS: Laboratori d’anàlisi i control de qualitat Crèdit : Assajos microbiològics Càlculs previs

Data: 12/11/10-19/11/10

Página 2 de 6

Hem de preparar 300 ml de dissolució d’agar per tots els grups. Enl’ampolla ens especifica quant agar hem d’agafar:

Procediment 1. Hem de pesar els 6,9 g d’agar 2. Posem al vas de precipitats aigua calenta 3. Posem l’agar el vas de precipitats. 4. Afegim una mica més d’aigua destil·lada per netejar les possibles restes que hagin pogut quedar d’agar al vidre de rellotge 5. Arrasem amb aigua fins a 300mL. 6. Posem el vas amb una mosca dins en un agitador magnètic i eldeixem fins que bulli durant 2 minuts . 7. Posem el líquid a dins l’ampolla ens podem ajudar amb un embut, el tapem sense enroscarlo del tot. 8. Finalment el posem a esterilitzar a l’autoclau a 120ºC durant 15 minuts. Qüestions Preparació de medis  Si a la classe hi ha 9 grups de treball. Calculeu el material necessari i la quantitat de medi a preparar per tenir prou per tots els grups més 1.Quantitat de cada medi: G 1 2 3 4 5 6 7 Material 9 + 1 tubs d’assaig 9 + 1 tubs d’assaig 9 + 1 tubs d’assaig 9 + 1 tubs d’assaig 9 + 1 tubs d’assaig 27 + 3 plaques de petri 9 + 1 plaques de petri Medis Aigua de triptona Brou McConkey Agar TSA Agar Kigler Aigua amb colorant Medi sòlid amb ampolla agar TSA Medi sòlid en tub agar TSA mL per parella 10 10 10 10 10 45 15 Total mL a preparar 90 + 10 90 + 1090 + 10 90 + 10 90 + 10 405 + 45 135 + 15

Material necessari: 60 tubs d’assaig, 40 plaques de petri, 1 ampolla, 10 campanes Durham.

CFGS: Laboratori d’anàlisi i control de qualitat Crèdit : Assajos microbiològics

Data: 12/11/10-19/11/10

Página 3 de 6

 Tenint en compte que cada grup ha de fer feina com distribuiríeu la feina anterior entre els diferents grups? Grup 1: Preparar elmaterial necessari per a tots els grups i al final posar a esterilitzar tot el necessari a l’autoclau. Grup 2: Preparar 100mL d’aigua de triptona i posar-ne 10mL a cada tub. Grup 3: Preparar 100mL de brou McConkey i posar-ne 10mL a cada tub amb una campana Durham. Grup 4: Preparar 100mL d’agar TSA i posar-ne 10mL a cada tub. Grup 5: Preparar 100mL d’agar Kigler i posar-ne 10mL a cada tub. Grup 6:Preparar 100mL d’aigua en colorant i posar-ne 10mL a cada tub. Grup 7: Preparar 450mL d’agar TSA i posar-lo en una ampolla. Grup 8: Preparar 150mL d’agar TSA i posar-ne 15mL a cada tub. Grup 9: Preparar les plaques que s’han de posar a esterilitzar.

Sembres
 Feu un esquema de cada tipus de sembra i expliqueu quin es el pas de més dificultat. Sembra en medi líquid            Flamegemla nansa de Kolle amb punta rodona per esterilitzar-la i la deixem refredar a prop del foc. Obrim el tub on es troba el microorganisme Flamegem la boca. Introduïm la nansa, agafem la mostra. Flamegem la boca del tub i el tapem. Obrim el tub amb el medi de cultiu líquid i flamegem la boca. Sembrem introduint dintre la nansa amb inòcul i agitant dins del medi. Flamegem la boca del tub i tapem....