Preparación De Curva Standar Electroforesis En Gel De Agarosa
Páginas: 2 (441 palabras)
Publicado: 25 de noviembre de 2012
Resultados Electroforesis:
El factor de medición utilizado esta expresado en “unidades”, esto porque solo interesa la distancia que recorrió cada banda dentro del gel para así comparar su migraciónrelativa Para el cálculo de la migración relativa de ADN, se considero que el gel tenía una longitud total de 100 “unidades”, con esto las distancias de migración fueron las siguientes: Migración (en“unidades”) 22.33 24.81 27.44 29.61 31.78 33.33 36.12 38.45 42.33 6.51 52.87 57.67 63.26 69.15 Pares de bases (bp) 10000 8000 6000 5000 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 750 500 250 Rf (dist.Recorrida/dist. Total) 0.22 0.24 0.27 0.29 0.31 0.33 0.36 0.38 0.42 0.46 0.52 0.57 0.63 0.69
Los resultados destacados en la tabla anterior, indican las bandas del gel que se podían apreciar con mayorfacilidad. Esto nos permitió tener una referencia de la ubicación de cada banda al momento de analizar el gel. S A B C D *ADN circular *ADN súper enrollado Para este análisis se utilizó el ADN circularDistancia de 100 “unidades”
Carril S: A: B: C: D:
Contenido Standard Pet 1 Pet 2 pGlo 1 pGlo 2
Standard utilizado:
GeneRuler™ 1kb DNA Ladder, ready-to-use
Análisis de los datos delgel:
A partir de los datos de la tabla anterior se realizo un grafico, “la curva estándar”. Con este fue posible calcular los tamaños moleculares (bp) de los plasmidios estudiados en este práctico. Paraformar la curva estándar, en primer lugar se grafican “migración v/s tamaño molecular, posteriormente la grafica resultante se “rectifica” para dar lugar a una recta. Finalmente, se interpolan losdatos obtenidos en el gel (en este caso el de migración del ADN) dentro de la recta y así se pudo obtener el tamaño molecular de los plasmidios Pet (1), Pet (2), pGlo (1) y pGlo (2)
Para lainterpolación de los datos se uso la ecuación:
Y = mX + b
Donde: *Y = Migración del ADN *X = Tamaño molecular Entonces:
(Migración) = m (tamaño molecular) + b
Despejando la ecuación y reemplazando...
El factor de medición utilizado esta expresado en “unidades”, esto porque solo interesa la distancia que recorrió cada banda dentro del gel para así comparar su migraciónrelativa Para el cálculo de la migración relativa de ADN, se considero que el gel tenía una longitud total de 100 “unidades”, con esto las distancias de migración fueron las siguientes: Migración (en“unidades”) 22.33 24.81 27.44 29.61 31.78 33.33 36.12 38.45 42.33 6.51 52.87 57.67 63.26 69.15 Pares de bases (bp) 10000 8000 6000 5000 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 750 500 250 Rf (dist.Recorrida/dist. Total) 0.22 0.24 0.27 0.29 0.31 0.33 0.36 0.38 0.42 0.46 0.52 0.57 0.63 0.69
Los resultados destacados en la tabla anterior, indican las bandas del gel que se podían apreciar con mayorfacilidad. Esto nos permitió tener una referencia de la ubicación de cada banda al momento de analizar el gel. S A B C D *ADN circular *ADN súper enrollado Para este análisis se utilizó el ADN circularDistancia de 100 “unidades”
Carril S: A: B: C: D:
Contenido Standard Pet 1 Pet 2 pGlo 1 pGlo 2
Standard utilizado:
GeneRuler™ 1kb DNA Ladder, ready-to-use
Análisis de los datos delgel:
A partir de los datos de la tabla anterior se realizo un grafico, “la curva estándar”. Con este fue posible calcular los tamaños moleculares (bp) de los plasmidios estudiados en este práctico. Paraformar la curva estándar, en primer lugar se grafican “migración v/s tamaño molecular, posteriormente la grafica resultante se “rectifica” para dar lugar a una recta. Finalmente, se interpolan losdatos obtenidos en el gel (en este caso el de migración del ADN) dentro de la recta y así se pudo obtener el tamaño molecular de los plasmidios Pet (1), Pet (2), pGlo (1) y pGlo (2)
Para lainterpolación de los datos se uso la ecuación:
Y = mX + b
Donde: *Y = Migración del ADN *X = Tamaño molecular Entonces:
(Migración) = m (tamaño molecular) + b
Despejando la ecuación y reemplazando...
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