Preparación de medios de cultivo

Preparación y esterilización de medios de cultivo
Introducción: hay 3 métodos generalmente aceptadas para la esterilización que son : el calor la filtración y el uso de sustancias químicas.Objetivo:
Conocer los medios de cultivo que hay en el laboratorio. preparar y esterilizar medios de cultivo.
Materiales:
* Olla de presión
* 3 mecheros
* 3 soportes
* papelestraza
* Cinta testigo
* cajas de petri
* medios de cultivo (Agar, caldo semisólido)
* cinta masking o etiquetas
* agua destilada
* tubos de ensayo
* matrazMedio de cultivo
* Base de agar sangre
(Aislamiento, cultivo y actividad hemolítica de gérmenes de difícil crecimiento)
* Métodos de preparación
Rehidratar 40g del medio en un litrode agua destilada; Reposar cada 10 o 15 min. Calentar agitando frecuentemente hasta el punto de ebullición durante 1 minuto para disolverlo por completo. Esterilizar en autoclave a 121 C (15libras de presión) durante 15minutos.Enfriar aproximadamente a 45 c y agregar de 5 a 10 % de sangre de carnero o conejo estéril desfibrinada girando suavemente el matraz para evitar laformulación de burbujas homogenizar y vaciar en cajas de petri estériles.
Formulas :
Agar 15.0
cloruro de sodio 5.0
infusión de musculo cardiaco 10 .0
Peptonas 10.0
Ph 7.3 + 0.2Procedimiento solido
* Prepara el medio en un matraz la cantidad necesaria
* calentar para disolver
* esterilizar el medio en autoclave preparar el matraz para esterilizar.
* yaesterilizado el medio se deja enfriar un poco y se vacía repartiendo en cajas de peltri aproximadamente de 15 a 20 ml.
* En caso de agar sangre se agregan 3 ml de sangre antes de vaciar lascajas.

Procedimiento – liquido
* preparar medio en el matraz. calentar para disolución
* reportar en pipeta acada tubo aproximadamente de 15 a 20 ml.
* esterilizar en autoclave