PREPARACI N BUFFERS

Preparación de Buffers



a) TAE 10 X (1 Lt) pH = 8,0

48, 4 gr Tris – Base
11,4 ml ácido acético glacial
20 ml EDTA (0.5M)

EDTA 500 mM (250 ml)
PM: 372,2 gr/mol

gr = m x PM 186,1 gr 1000 ml
gr = 0,5 M x 372,2 gr/mol x gr 250ml
gr = 186,1
x = 46,525 gr

b) TBE 10 X (1 Lt) pH = 8,2

108 gr Tris
55 gr ácido bórico
9,3 gr EDTA


c)CTAB pH = 8,2

3 % p/v CTAB
1,4 M NaCl
20 mM EDTA
1 M Tris – HCl

d) MOPS 10 X

0.2 M Mops (pH 7.0)
20 mMAcetato de Sodio
10 mM EDTA (pH:8.0)

Disolver 41.8 gramos de MOPS en 700 ml de agua estéril tratado con DEPC. Ajustar a pH 7.0con NaoH. Adicionar 20 ml de acetato de sodio 1M y 20 ml de EDTA 0.5 M pH 8.0. Ajustar volumen de la solución a 1 litro.Buffer Carga Agarosa (DNA) para 10 ml (0.0025 g Azul de Bromofenol, 7 ml Glicerol, 3 ml EDTA 12 mM disuelto en agua)
0,025 % Azul deBromofenol
70 % Glicerol
EDTA 12 mM

Buffer Carga Page (DNA) para 10 ml (0,0025 g Azul de Bromofenol, 0,0025 g Xileno, 5 ml Glicerol,5 ml de Urea 5 M disuelta en agua)
0,025 % Azul de Bromofenol
0,025 % Xileno
5 M Urea
50 % Glicerol


Buffer Carga Agarosa (RNA)para 10 ml (Formamida desionizada 9.5 ml, 0.0025 g Azul de Bromofenol, 0.0025 g FF Cyanol Xilene, 100 l EDTA 5 mM, 0.025 % SDS)