Preparacion De Colorantes

MICROBIOLOGIA APLICADA
Manual de Laboratorio

APENDICE “B”
PREPARACION DE COLORANTES

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I. TINCION SIMPLE.
a) Safranina.Safranina...................................... 0.5 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparación:
− Disolver el colorante en el agua.
b) Cristal violeta.
Cristalvioleta.................................... 1 g
Agua destilada.............................. 100 mL
Preparación:
− Disolver el colorante en el agua.
c) Azul de metileno.
Azul de metileno............................ 3 mL
Etanol de96%............................. 20 mL
Agua destilada............................ 100 mL
Preparación:
− Disolver el colorante en alcohol.
− Agregar el agua y filtrar.

II. TINCION DE GRAM.
a) Cristal violetay oxalato de amonio. (Reactivo de Hucker)
Solución A:
Cristal violeta (pureza del colorante de por lo menos, el 90%)........ 2 g
Etanol(95%)................................................................................... 20 mL

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Solución B:
Oxalato de amonio.............................................. 0.8 g
Aguadestilada..................................................... 80 mL
− Mezclar cada uno de los solutos en su disolvente respectivo.
− Dejar la solución de oxalato de amonio en reposo durante una noche o calentarligeramente hasta que se solubilice.
− Mezclar las dos soluciones y filtrar.
b) Solución de yodo yodurado. (Lugol)
Yodo (químicamente puro).............. 1 g
Yoduro de potasio........................... 2 gAgua destilada............................ 300 mL
Preparación:
−
−
−
−
−

Combinar el yodo y el yoduro de potasio con la ayuda de un mortero.
Lavar el contenido de éste con pequeñas alícuotas de aguadestilada.
Agregar agua suficiente para obtener un total de 300 mL.
Agitar fuertemente.
Almacenar la solución en una botella oscura y con tapón de vidrio.

c) Alcohol acetona.
Alcohol etílico...