preparacion de medios de cultivo microbianos

LABORATORIO No. 2
PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO DE MICROORGANISMOS

Acosta Adriana 2120351005, Galindres Gerson 2120351098, Morales Álvaro 2120351149
Universidad de Nariño, Facultad de Ingeniería Agroindustrial, Semestre 4
adrianaacosta1994@gmail.com, vladdo_201@hotmail.com






Palabras clave: medio de cultivo, agar, aspecto, esterilización.
INTRODUCCIÓN:
Uno de lossistemas más importantes para la identificación de microorganismos es observar su crecimiento en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el medio de cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el cultivo. Se han preparado más de 10.000 medios de cultivo diferentes.
Para que las bacterias crezcanadecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presión de oxigeno adecuadas, así como un grado correcto de acidez y alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayoría de las bacterias patógenas requierennutrientes complejos similares en composición a los líquidos orgánicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo. Se licua completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él. En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de carbono se adicionan por dos motivos fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medioy para detectar reacciones de fermentación de los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se añaden para promover el crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
En esta práctica de laboratorio se va a preparar un medio de cultivo sintético denominado agar count plate (agar de recuento en placa).
METODOLOGÍA:
Preparación del medio de cultivo:
Concálculos previamente realizados se pesan en una balanza 2,25 g de agar de recuento en placa sobre un pedazo de papel. Se miden 100 ml de agua destilada en una probeta y se trasvasan en un erlenmeyer. Luego se toma la muestra de agar y se diluye en el erlenmeyer con ayuda de una varilla de vidrio. Para facilitar la dilución se lleva el erlenmeyer a una estufa a punto de ebullición hasta apreciar uncolor amarillo y no haya precipitados del agar.
La solución resultante se cubre con papel aluminio en la boquilla del erlenmeyer y se marca sobre él el nombre del medio de cultivo para diferenciarlo con otros medios preparados.
Método de esterilización:
Se utiliza una autoclave como método de control del crecimiento microbiano. Se introduce el erlenmeyer en el recipiente, se cierra y asegura latapa de la autoclave y se acondicionan la temperatura (121 ºC) y la presión (15 libras) adecuadas por un periodo de tiempo de 15 minutos.
Distribución del medio de cultivo:
Terminado el tiempo de esterilización, se deja expulsar el vapor de la autoclave con cuidado antes de abrir la tapa. Luego se saca el erlenmeyer del recipiente con un trapo para evitar quemaduras, se deja enfriar y se retirael papel aluminio de la boquilla del erlenmeyer.
Luego se enciende el mechero y se ubican 6 cajas de petri alrededor, previo a esto se debe desinfectar el área de trabajo con alcohol y un trapo. Lo siguiente que se hace es distribuir en cada caja de petri el medio de cultivo preparado en el erlenmeyer hasta recubrir la base de cada caja, se debe abrir parcialmente la tapa de cada caja para...