PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

PRACTICA N° 3

PREPARACION DE MEDIOS DE CULTIVO

I. INTRODUCCION
En la actualidad se pueden cultivar, fuera de su hábitat normal, la mayoría de los microorganismos heterótrofos, cuyo grupo pertenece a los patógenos, por eso hay que destacar la importancia de la preparación y selección adecuada de los medios de cultivo.
Un medio de cultivo es un sustrato o solución de nutrientes en los quecrecen y se multiplican los microorganismos en el laboratorio, con el objeto de aislar las diferentes especies bacterianas, para luego proceder a su identificación y llevar a cabo una serie de estudios complementarios.
En los medios de cultivo empleados para la propagación deben tener ciertas condiciones adecuadas como: humedad, Ph, temperatura.





ALMACENAMIENTO DE LOS MEDIOS DE CULTIVOLos medios de cultivo deshidratados se deben almacenar en envases sellados bajo las condiciones que señale el fabricante. Generalmente se almacenan en un lugar fresco (entre 15 y 25°), con poca humedad y protegidos de la luz solar directa.
Nunca se deben almacenar cerca de autoclaves, hornos, ni otra fuente de calor o vapor. Los medios de cultivo deshidratados son higroscópicos. Cuando losenvases de estos medios de cultivo deshidratados son abiertos para su uso inicial, se debe tener la precaución de cerrarlos tan pronto como sea posible y mantenerlos bien cerrados para prevenir la entrada de humedad.
La absorción de agua produce cambios de pH, formación de grumos, decoloraciones del polvo, etc., lo cual indica que deben ser descartados porque pueden haber sufrido cambios químicoso estar contaminados. Una vez que el medio de cultivo ha sido preparado y esterilizado, puede almacenarse a temperatura ambiente por un periodo máximo de 2 semanas protegido de la luz, o por periodos mayores a 12 -15ºC.
Sin embargo, almacenados bajo refrigeración entre 2 y 8°C se prolonga la vida útil de los mismos, (nunca por debajo de 0ºC porque se destruye la estructura del gel). Los mediosde cultivo se deben mantener en recipientes bien cerrados para evitar su deshidratación y cuando se usa tapón de algodón, se debe colocar por encima una envoltura de papel (Craft).
Otro punto importante a tomar en cuenta, es que cada lote de medio de cultivo preparado debe pasar por un riguroso proceso de control de calidad, en donde se determinan sus propiedades fisicoquímicas (apariencia, pH,etc.) y microbiológicas (esterilidad y promoción de crecimiento) verificando que cumplan con los requisitos de calidad establecidos y por ende demostrar que son aptos para su uso.







II. OBJETIVOS

El estudiante debe estar en la capacidad de elegir y preparar medios de cultivo utilizados en microbiología para el aislamiento de diferentes microorganismos.
Reconocer la necesidad deevitar la contaminación tanto de los medios de cultivo como de los demás elementos utilizados en el laboratorio n de microbiología

III. MATERIALES

Balanza de precisión o analítica.

Autoclave.



Mechero de bunsen.

Trípode.



Malla de asbesto.

Espátula.


Matraces de 100ml., 250 ml.

Tubos de prueba de 13 x 100 ml.



Cajas Petri

Agua destilada



BalanzaAlgodón


















Medios de cultivo:




























Agar solido macConkey












Medio liquido





Tripteina soya agar










IV. MARCO TEORICO
La preparación adecuada de un medio de cultivo nos permite disponer de los nutrientes y condiciones necesarias para favorecer elcrecimiento de los microorganismos en el laboratorio.
CLASIFICACION DE LOS MEDIOS DE CULTIVO

SEGÚN SU ESTADO FÍSICO (CONSISTENCIA).
1) Medios líquidos: Son los que se presentan en este estado, denominándose por esta razón caldos. El medio líquido más utilizado es el llamado caldo nutritivo, compuesto principalmente de extracto de carne, peptona y agua. Se utiliza fundamentalmente cuando se pretende...