preparacion y tinciones

PREPARACIONES Y
TINCIONES

PREPARACIONES
• En fresco
• Temporales:

Microcultivos de hongos, preparaciones de
tejidos

• Fijas:
Gram, Ziehl Nielsen, Sheaffer y fulton, SEM, TEM,
naranjade acridina.

CONTRASTE DE FASES

PREPARACIONES TEMPORALES:

microcultivo de hongos

1.

Colocar en una caja de petri, un soporte para
portaobjetos, un portaobjetos, 2 cubreobjetos yesterilizar a 121°C por 15 min.

2.

Colocar sobre el portaobjetos un fragmento de agar
papa dextrosa de 1cm2.

3.

Inocular con el asa micológica cada lado del cuadrito
de agar con el cultivodel hongo. Colocar encima un
cubreobjetos.

4.

Colocar a un lado, una torunda de algodón
impregnada de glicerol al 10%, estéril; incubar a
28°C durante 48 h.

MICROCULTIVO

PREPARACIONESTEMPORALES:

microcultivo de hongos
5.

Eliminar la torunda y agregar dos gotitas de
formaldehído g.r. Dejar reposar una hora.

6.

En un portaobjetos, colocar una gotita de azul
dealgodón y colocar el cubreobjetos superior
del microcultivo, sellar con esmalte de uñas
transparente. Eliminar el agar y colocar otra
gotita de azul de algodón, sellar con esmalte.

7.

Observar a 10Xy 40 X. Realizar
respetando los aumentos y colorearlos.

dibujos

MICROCULTIVO

Penicillium sp.

Acremonium sp.

Preparaciones Fijas
Agentes fijadores
• Agentes físicos .- calor,resinas
• Agentes químicos:
Etanol al 100%
Paraformaldehído
Gliceraldehído
tetróxido de osmio

Preparaciones Fijas:
• Transferir una pequeña porción de la
colonia a un portaobjetos limpio ydesengrasado, homogeneizar con una
gotita de agua.
• Dejar secar al aire y fijar con calor
suave.

TINCIONES
• TINCIONES SIMPLES
• TINCIONES DIFERENCIALES
• TINCIONES ESPECÍFICAS

Tinción deGram
• Colocar una gotita de cristal violeta sobre el
frotis, dejar interactuar 1 min. Enjuagar con agua
• Colocar una gotita de lugol durante 1 min.,
enjuagar con agua
• Colocar dos gotitas...