Preparación, Fijación Y Coloración Simple De Frotis. Tinción Diferencial De Gram Y Tinciones Selectivas.
Páginas: 8 (1843 palabras)
Publicado: 7 de octubre de 2012
MICROBIOLOGIA
GENERAL
PRACTICA: 2 Y 3
Preparación, fijación y coloración simple de frotis.
Tinción diferencial de gram y tinciones selectivas.
OBJETIVOS
• Aprender diferentes técnicas de aislamiento para la obtención de cultivos microbianos puros.
• Aprender las técnicas de preparacionesde frotis, fijación y tinción más utilizadas en el estudio microscópico de cultivos microbianos así como la observación de su forma y agrupación.
INTRODUCCIÓN
La siguiente práctica se realizó bajo medidas y condiciones básicas para el estudio de los microorganismos, donde se cultivaron pequeñas poblaciones bacterianas en cajas Petri con medios de cultivos específicos, de los cuales al crecersu población, se tomaron pequeñas fracciones de esos cultivos y por medio de tinciones fueron puestas bajo el lente del microscopio de campo claro. La mayor contribución de todo el procedimiento experimental es el conocer las características fisiológicas de todos los microorganismos.
A continuación se mencionan cuales son todas las características necesarias para cultivar y hacer tinciones conlos microorganismos:
Tinción de células
El tamaño de la mayoría de las células de microorganismos es tan pequeño que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tiposdiferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente(cationes) los cuales se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales comomuchas proteínas.
Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; el cual se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el colorante.
El proceso de fijación se lleva a cabo para mantener a la célula muerta pero conlas características intactas.
Tinciones diferenciales
Se denominan así porque son procedimientos mediante los cuales no se tiñen del mismo modo toda clase de células. Un procedimiento de tinción diferencial importante muy utilizado en la bacteriología es la tinción de Gram.
Según reaccionen a la tinción de Gram, las bacterias se pueden dividir en dos grupos principales: Gram positivas y Gramnegativas. Después de la coloración de Gram, las bacterias Gram positivas aparecen de color purpura, y las bacterias Gran negativas aparecen coloreadas en rojo. Estas diferentes maneras de reaccionar a la tinción de Gram se deben a las diferencias en la estructura de la pared celular de las células Gram positivas y Gram negativas.
La tinción de Gram es uno de los procedimientos de tinción másútiles en el laboratorio bacteriológico; es prácticamente indispensable, para identificar una bacteria desconocida, conocer si es Gran positiva o Gram negativa.
MATERIAL
TECNICAS DE TINCION SIMPLE DIFERENCIAL Y GRAM
10 Portaobjetos EQUIPO/GRUPO
2 Mecheros Bunsen
1 Piceta con agua destilada
1 Piceta con alcohol
1 asa de inoculación
2 Pipetas Pasteur con bulbo REACTIVOS
1 Vaso...
GENERAL
PRACTICA: 2 Y 3
Preparación, fijación y coloración simple de frotis.
Tinción diferencial de gram y tinciones selectivas.
OBJETIVOS
• Aprender diferentes técnicas de aislamiento para la obtención de cultivos microbianos puros.
• Aprender las técnicas de preparacionesde frotis, fijación y tinción más utilizadas en el estudio microscópico de cultivos microbianos así como la observación de su forma y agrupación.
INTRODUCCIÓN
La siguiente práctica se realizó bajo medidas y condiciones básicas para el estudio de los microorganismos, donde se cultivaron pequeñas poblaciones bacterianas en cajas Petri con medios de cultivos específicos, de los cuales al crecersu población, se tomaron pequeñas fracciones de esos cultivos y por medio de tinciones fueron puestas bajo el lente del microscopio de campo claro. La mayor contribución de todo el procedimiento experimental es el conocer las características fisiológicas de todos los microorganismos.
A continuación se mencionan cuales son todas las características necesarias para cultivar y hacer tinciones conlos microorganismos:
Tinción de células
El tamaño de la mayoría de las células de microorganismos es tan pequeño que resultan difíciles de ver con el microscopio óptico. La principal dificultad es la falta de contraste entre la célula y el medio que la rodea, y el medio más simple de aumentar el contraste es la utilización de colorantes. Estos pueden emplearse para distinguir entre tiposdiferentes de células o para revelar la presencia de determinados constituyentes celulares, tales como flagelos, esporas, cápsulas, paredes celulares, centros de actividad respiratoria, etc.
La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente(cationes) los cuales se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales comomuchas proteínas.
Algunos colorantes teñirán mejor sólo después de que la célula haya sido tratada con otra sustancia química, que no es un colorante por sí mismo. Esta sustancia se denomina mordiente; el cual se combina con un constituyente celular y lo altera de tal modo que ahora sí podrá atacar el colorante.
El proceso de fijación se lleva a cabo para mantener a la célula muerta pero conlas características intactas.
Tinciones diferenciales
Se denominan así porque son procedimientos mediante los cuales no se tiñen del mismo modo toda clase de células. Un procedimiento de tinción diferencial importante muy utilizado en la bacteriología es la tinción de Gram.
Según reaccionen a la tinción de Gram, las bacterias se pueden dividir en dos grupos principales: Gram positivas y Gramnegativas. Después de la coloración de Gram, las bacterias Gram positivas aparecen de color purpura, y las bacterias Gran negativas aparecen coloreadas en rojo. Estas diferentes maneras de reaccionar a la tinción de Gram se deben a las diferencias en la estructura de la pared celular de las células Gram positivas y Gram negativas.
La tinción de Gram es uno de los procedimientos de tinción másútiles en el laboratorio bacteriológico; es prácticamente indispensable, para identificar una bacteria desconocida, conocer si es Gran positiva o Gram negativa.
MATERIAL
TECNICAS DE TINCION SIMPLE DIFERENCIAL Y GRAM
10 Portaobjetos EQUIPO/GRUPO
2 Mecheros Bunsen
1 Piceta con agua destilada
1 Piceta con alcohol
1 asa de inoculación
2 Pipetas Pasteur con bulbo REACTIVOS
1 Vaso...
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