Presentacion 2

Técnicas de Microscopía aplicada a las Ciencias Forenses
Adaptación Open Course Ware (OCW)
Máster Ciencias Forenses
Universidad de Murcia

Sesión 2:

Fundamentos de Microscopía Óptica
Nicolás Ubero Pascal

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Técnicas de microscopía aplicadas a las Ciencias Forenses: Sesión 2

Máster en Ciencias Forenses

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Pictures Copyright
Nicolás Ubero Pascal

2

Microscopía óptica:
instrumentación y
principios
Autor:

David R. Caprette,
Ph.D.
Adaptación:

NicolásUbero

Compound Microscope, circa 1751

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Microscopio óptico compuesto
Cabezal

Estativo

Ocular
(adaptador para
los ojos)
Revolver
Objetivo
Platina móvil

Macrométrico
condensador
Micrométrico
Lente de campo
(fuente luminosa)
Control de
iluminación

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Máster en Ciencias Forenses

Técnicas de microscopía aplicadas a las Ciencias Forenses: Sesión 2Fundamentos técnicos de la microscopía óptica

Óptica (lentes)
Aumentos
Campo visual

Iluminación

Resolución

Contraste
Profundidad de

campo
Enfoque

Nicolás Ubero Pascal

5

Refracción
La luz se dobla en ángulo cuando incide
en una superficie

Aire

Al igual que un vehículo cambia su
dirección cuando entra en un terreno de
gravilla

Pavimento
suelto

Cristal

Esta primera
rueda frena
Ondaincidente
La
componente
que incide
primero
se ralentiza
primero

Pavimento
consolidado

Eje
perpendicular

La onda se comprime y se
dobla en el límite del medio
que produce la desaceleración

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Aumentos y Orientación I
Las líneas de puntos son
perpendiculares a la
superficie de la lente
Dirección de
la luz

rápido

lento

Posición
actual

Una lente biconvexa
curva laluz en la misma
dirección cuando entra
y cuando sale
Frog gastrula, saggital section; arrow indicates
yolk plug

rápido

Dirección del
movimiento

Imagen
proyectada

arriba

izquierda

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Dirección
aparente
abajo

Punto focal

Objeto
real

Imagen
aparente

derecha

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Aumentos y Orientación II
¿Por qué una lente de aumento simple
no produce una imagen invertida?
Con elobjeto más cerca de la lente que del punto focal,
los rayos de luz divergen dando al observador la ilusión
de que está viendo un objeto más grande, más alejado,
pero en la misma orientación..

object
focal
point

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Aumentos
Aumentos finales
usando una lente
simple (por ejemplo un
estereomicroscopio)
40x

100x

400x

40x

100x

400x

La misma imágen:
usando unmicroscopio óptico
compuesto

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Resolución
Resolución (d) =

0.61λ
n sin α

λ = Longitud de onda de la luz; n = índice de refracción

Escala de
resolución
teórica

0.2 µm
5 µm

2 µm
1 µm

0.4 µm

Escala de
resolución
de una 1
µm

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Campo visual y profundidad de campo
Volumen tridimensional
Teniendo en cuenta los cambios del aumentoescala = 5 mm

Volumen de espacio observado

40x

Profundidad de campo
a diferentes aumentos

cubreobjeto (#1) 0.15
mm thick
Profundidad de una
típica muestra
montada en humedat
0.1 mm

100x
400x

Grosor del portaobjeto
normal
1 mm

40x

100x
400x
1000x

1000x

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Campo visual e intensidad de la luz
Aumento final

Campo aparente:
(izquierda) Sin ajustar el brillo...