Presion_osmotica_y_p_H

Otras influencias en el crecimiento microbianoPresin osmtica y pH Objetivos Definir presinosmtica y explicar como afecta a una clula. Explicar como el crecimiento microbiano est relacionadoa lapresin osmtica y pH. Prepararyusar un gradiente en placa. Materiales Placas de petri conteniendo agar nutritivo 5, 10 , 15 de ClNa (una de cada una), Placas de petri conteniendoagar nutritivo 10 , 25, 50 de sacarosa (una de cada una), Placas de petri conteniendo agar nutritivo. Gradiente en placa Cajas de petri estriles Tubos conteniendo agar nutritivo fundido 25 de ClNa 50 de sacarosa Enriquecimientos de sal azcar Efecto del pH sobre el crecimiento Tubos conteniendo caldo nutritivo ajustado a pH 2.5, 5, 7, 9.5, (uno de cada uno) Cultivos Efectos de la presin osmtica sobre elcrecimiento E. coli Staphylococcus aureus Sacharomyces (una levadura) Penicillium (un hongo) Efecto del pH sobre el crecimiento Staphylococcus aureus Alcaligenesfaecalis E.coli Serratiamarcescens Penicillium Sacharomyces Tcnicas requeridas Anza para inocular y estriado en placa Procedimiento Obtener un conjunto de placas de agar nutritivo sal agar nutritivo sacarosa. Dibujar dos lneascruzadas para formar cuatro cuadrantes sobre el fondo de una placa. Inocular cada cuadrante con uno de los organismos con un anza estril y rotularlo. Repetir este procedimiento para todas las placas (6). Marcar la placa control (agar nutritivo solamente). Ubicar una ansada de la suspensin del hongo en el cuadrante restante de cada placa (6). Invertir la placa e incubar a 35C durante 24 y 48 hr.Registrar las cantidades relativas de crecimiento de bacterias y levaduras segn 4 el mejor, y los otros relativos a este cultivo Incubar la placa a T ambiente de 2 a 4 das y registrar cantidades relativas del crecimento del hongo. Gradiente en placa Verter una capa de agar nutritivo en una placa estril y permitir que solidifique inclinada. Dibujar sobre el fondo de la placa una lnea en elextremo correspondiente al lado ms alto de agar y rotularlo bajo. Dibujar 4 lneas perpendiculares a la primera y rotularla segn sacarosa 0.5, 5 , 10, 15 sal 0.5 , 5 , 15, 30 Verter una capa de agar con sal o azcar sobre el agar nutritivo. Permitir que solidifique. Enriquecimientos (ya preparados) Colocar pasas de uva en tubos de caldo nutritivo 0.5 sacarosa, 5 , 10 , y 15 . Inocularcarne picada en tubos de caldo nutritivo 0.5 de ClNa, 5, 15 , y 30 . Con estos enriquecimentos inocular el gradiente en placa por encima de las lneas premarcadas. Estriar desde la zona de ms baja concentracin, a la de ms alta concentracin. Incubar la placa invertida a 35C de 24 a 48 hr y registrarlos patrones de crecimiento. Efecto del pH sobre el crecimiento Inocular una ansada de suorganismo en cada tubo del caldo nutritivo a distintos pH. Incubarlos tubos a 35C de 24 a 48 hr. Registrar sus resultados y los resultados para los organismos probados por sus compaeros. Informe Efecto de la presin osmtica en el crecimiento Organismo (cantidad de crecimiento) Medio S. Aureus E. Coli levadura hongo------------------------------------------------------------------------------------------------------------------ Agar nutritivo 5 ClNa 10 15 10 sacarosa 25 50 escala 4 mximo de crecimiento 3 mucho crecimiento 2 crecimiento moderado 1 crecimiento mnimo no hay crecimiento Gradiente en placa Dibuje y explique su patrn de crecimiento y el de otrogrupo. Efecto del pH en el crecimientoCrecimiento de PH S. Aureus A. Faecalis E. Coli hongo levadura S. Marcescens ----------------------------------------------------------------------------------------------------------------- 2.5 5 7 9.5 Conclusiones Qu organismo tolera mejor altas concentraciones de azcar y sal Compare la tolerancia osmtica de las bacterias y el hongo. Cul es la tolerancia osmtica...