previo 3 bioquimica

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTONOMA DE MÉXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLÁN

HERNANDEZ HERNANDEZ MARCO ANTONIO

LABORATORIO DE QUIMICA ESTRUCTURAL

PREVIO 3 METODOS DE LA BIOQUÍMICA: PARTE 2 (ESPECTROFOTOMETRIA Y ELECTROFORESIS)

OBJETIVOS

Llevar a cabo la técnica de calorimetría.
Conocer la utilidad de este método para el análisis de una muestra
Practicar laseparación de una mezcla de aminoácidos con la técnica de electroforesis.



1. ¿Cuál es el fundamento de la espectroscopia?

El termino espectrofotometría se refiere a el uso de la luz para medir las concentraciones de sustancias químicas La base de la espectrofotometría así como de la colorimetría es que muchas sustancias tienen color propio, o pueden dar lugar a productos finales coloreados enciertas reacciones químicas. Existe una relación entre la intensidad de este color y la concentración del producto final, o sea la concentración de uno o varios de los reactivos; de esta forma se puede utilizar para que por medio de mediciones espectrofotométricas determinar la concentración.
Cuando una muestra absorbe luz, la potencia radiante del haz de luz disminuye. La potencia radiante,P, se evalúa como energía por segundo por unidad de área del haz de luz. La luz se hace pasar por un monocromador (un prisma una rejilla de difracción o un filtro) para aislar una sola longitud de onda. Esta ultima de potencia radiante P0, incide sobre una muestra de espesor b. la potencia radiante del haz emergente es P; la muestra puede absorber una fracción de la luz, de manera que P≤Po.
Latransmitancia, T, se define como la fracción de la luz incidente que sale de la muestra

Por lo tanto, T varía de cero a uno. La transmitancia porcentual es simplemente 100. T y varia entre cero y 100 %. Una magnitud física mas útil es la absorbancia, que se define como:


Cuando no se absorbe luz, P=P0 y entonces A= 0. Cuando se absorbe 90% de la luz, 10% de ella se transmite y P= Po /10. Con este se tiene A=1. Cuando solo se transmite el 1% de la luz, A=2. La absorbancia también se llama a veces densidad óptica, se abrevia DO y en ocasiones se presenta por E.

La importancia de la absorbancia estriba en que es directamente proporcional a la concentración de especie absorbente en la muestra. Ley de Beer.






2. ¿Cuál es la diferencia entre espectrofotometría ycolorimetría? ¿Cuál es la diferencia entre espectrofotometría y colorimetría?

DIFERENCIAS
Colorimetría
Espectrofotometría
Utiliza sustancias que contienen color propio para poder ser analizadas y así conocer su concentración.

Se usa el término colorímetro para designar a un instrumento para medidas de absorción, en el que el ojo humano es el detector utilizando uno o más patrones decomparación del color.







No solo trabaja con sustancias que presentan color propio si no que también con sustancia incoloras o que aparentan no tener color.

Un espectrómetro es un instrumento que proporciona información sobre la intensidad de la radiación en función de la longitud de onda o de la frecuencia. Los elementos dispersantes en algunos espectrómetros son multicanal, se puedenobservar simultáneamente dos o más frecuencias. Un espectrofotómetro es un espectrómetro equipado con uno o más rendijas de salida y detectores fotoeléctricos que permiten la determinación de la relación entre la potencia de dos haces en función de la longitud de onda como en la espectroscopia de absorción.




3. Realice un diagrama de los componentes básicos de un espectrofotómetro.P0 P


b


4. ¿Qué es una curva patrón, tipo o de calibración y cómo se construye?

Una curva patrón es un grafico en el que esta representada la relación Absorbancia-Concentración. De una muestra de concentración conocida, de esta forma con la curva patrón podemos comparar después la curva patrón con una curva de una muestra de concentración desconocida.
La forma en que se...