previo analitica

Revista Científica
Universidad del Zulia
revistafcv@gmail.com

ISSN (Versión impresa): 0798-2259
VENEZUELA

2005
Rosa De Jesús / Nancy Moreno / José A. Martínez
ENSAYO DE DOS MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE ADN DE RATÓN PARA SER
USADO EN EL CONTROL GENÉTICO DE RATONES CONSANGUÍNEOS
MEDIANTE LA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR)
Revista Científica, abril, año/vol. XV, número 002Universidad del Zulia
Maracaibo, Venezuela
pp. 134-140

Red de Revistas Científicas de América Latina y el Caribe, España y Portugal
Universidad Autónoma del Estado de México
http://redalyc.uaemex.mx

__________________________________________________________Revista Científica, FCV-LUZ / Vol. XV, Nº 2, 134-140, 2005

ENSAYO DE DOS MÉTODOS DE EXTRACCIÓN DE ADN DE RATÓN
PARA SER USADO EN ELCONTROL GENÉTICO DE RATONES
CONSANGUÍNEOS MEDIANTE LA REACCIÓN EN CADENA
DE LA POLIMERASA (PCR)
Assay of Two Extraction Methods of DNA of Mouse by Using Polymerase Chain
Reaction (PCR) For to Make Monitoring Genetic Inbred Mice
1

2

Rosa De Jesús , Nancy Moreno y José A. Martínez
1

3

2

Laboratorio Fisiología Animal Facultad de Ciencias, Universidad de Los Andes. Laboratorio deBiología Molecular.
3
Núcleo Aragua, Universidad de Carabobo. Departamento de Biología Universidad Pedagógica Experimental Libertador.
Maracay-Venezuela. E-mail: rosadej@ula.ve.

RESUMEN
La utilización de marcadores genéticos de tipo microsatélite es
una herramienta importante para vigilar la pureza genética en
las cepas consanguíneas de ratón. El primer paso para realizar este estudio esdisponer de muestras de ADN con calidad
y cantidad que permita su análisis mediante métodos de Biología Molecular. En este trabajo se ensayaron dos métodos de
extracción de ADN, uno de ellos a partir de tejido de oreja mediante la Técnica HotSHOT y el otro utilizando muestras sanguíneas y basado en una precipitación salina. Se determinó la
calidad y la cantidad de ADN obtenido por ambos métodos,mediante electroforesis en gel de agarosa y espectrofotometría de luz ultravioleta respectivamente; también se probó la
capacidad del ADN para ser digerido por la enzima de restricción Sal I y de ser amplificado mediante la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR). Con el método de HotSHOT, se
obtienen muestras de ADN, cuya cantidad promedio es de
51,56 µg, con un índice A260/A280. de 1,2 yno son digeribles
por la enzima Sal I. Las muestras de ADN obtenidas por el
método de precipitación salina, tienen una cantidad promedio
de 13,50 µg, con un índice A260/A280. de 1,7; son digeribles
por la enzima Sal I, lo cual las hace aptas para estudios donde
se requiera hacer Southern blot. Dado que por ambos métodos se obtienen muestras amplificables por PCR, se seleccionó el método deHotSHOT, para el análisis de microsatélites,
por ser un método rápido y económico. Los resultados obtenidos son fundamentales para iniciar los estudios de control ge-

Recibido: 12 / 04 / 2004. Aceptado: 24 / 01 / 2005.

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nético a nivel molecular, en las líneas consanguíneas de ratones que se producen actualmente en cuatro bioterios del país.
Palabras clave: PCR, Extracción de ADN,microsatélite, ratón.

ABSTRACT
Microsatellite genetic markers are an important tool for the
screening of genetic purity in inbred strains of mice.The first step
to carry out this study is to obtain DNA samples of a quality and
quantity that make analysis with molecular biology methods possible. In this investigation we assayed two methods of DNA extraction: one of them using samples taken fromear tissue and
applying the HotSHOT technique; the second method used blood
samples and the saline precipitation. Agarose gel electrophoresis
and ultraviolet light spectrophotometry were used to determine
the quality and quantity of DNA obtained by both methods. Also
we tried the capacity of DNA to be digested for the restriction enzyme Sal I and to be amplified by Polimerase Chain Reaction...