prificacion de proteinas

CUESTIONARIO: PURIFICACION DE PROTEINAS
1.- Las proteínas desempeñan múltiples funciones, por lo que es importante identificarlas, y conocerlas. Así, cualquier alteración en las mismas puede causar algún cambio funcional y producir enfermedades específicas. ¿Por qué es importante conocer la secuencia primaria de las proteínas y como está relacionada esta secuencia con la información genética?¿Cuáles son sus implicaciones? Parte de las investigaciones bioquímicas requieren la purificación, al menos parcial, de las sustancias objeto de estudio. Esto requiere generalmente un gran esfuerzo ya que una célula contiene miles de sustancias diferentes, la molécula que buscamos puede ser extremamente inestable o encontrarse a concentraciones muy bajas. El conocimiento de las secuencias de DNAque integran nuestros genes no tiene un gran valor, si no se identifica cual es la función de dichos genes, en su caso, para que proteínas codifican.
2. ¿Porqué es importante purificar las proteínas, y que desafíos hay que enfrentar para lograrlo? Procesos que permiten aislar un sólo tipo de proteína de una mezcla compleja. La purificación de proteínas es vital para la caracterización de lafunción, estructura en interacciones de la proteína de interés, por ejemplo una enzima un receptor celular o un anticuerpo. El material inicial es generalmente un tejido biológico o un cultivo microbiano. Hay varios pasos en el proceso de purificación; puede liberar a la proteína de la matriz que lo confina, separar las partes proteica y no proteica de la mezcla, y finalmente separar la proteína deseadade todas las demás. Este último paso puede ser el aspecto más laborioso de la purificación de proteínas.
3. ¿Qué pasos se requieren para purificar una proteína? El primer paso en el aislamiento de una proteína es la rotura celular, para posteriormente poder extraer la proteína con un tampón adecuado. El método de rotura a elegir depende de las características mecánicas del tejido o células dedonde se va a aislar la proteína, así como de su localización.
4. ¿Que propiedades o características de las proteínas se aprovechan en los métodos clásicos de purificación? Para estudiar detalladamente las propiedades de cualquier proteína es preciso contar con una muestra homogénea que solo contenga moléculas de un tipo. Las propiedades de separación se concentran en el tamaño, la carga y lapolaridad, que es donde residen las diferencias de las moléculas. Se aplican muchas técnicas para eliminar contaminantes y lograr una muestra pura de la proteína de interés.


5.¿ Que métodos mecánicos de lisis celular se usan? La lisis celular se puede llevar a cabo mediante procesos de homogeneización mecánicos, físicos, químicos o enzimáticos, esto en función del objetivo de estudio; lacentrifugación se basa en la diferencia de sedimentación de las partículas que difieren en densidad, tamaño y forma, la sedimentación depende del campo centrífugo aplicado, expresado en múltiplos de fuerzas g
6. ¿A qué se llama extracto crudo, durante la purificación de proteínas?

7. La cromatografía es un método para separar proteínas, en que se basa este método y en que consiste? es un métodofísico o de separación para la caracterización de mezclas complejas, la cual tiene aplicación en todas las ramas de la ciencia y la física. Es un conjunto de técnicas basadas en el principio de retención selectiva, cuyo objetivo es separar los distintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar y determinar las cantidades de dichos componentes.
La cromatografía puede cumplir dos funcionesbásicas que no se excluyen mutuamente:
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros y que puedan ser usados posteriormente (etapa final de muchas síntesis).
Medir la proporción de los componentes de la mezcla (finalidad analítica). En este caso, las cantidades de material empleadas son pequeñas.

8. Menciona 5 tipos básicos de cromatografía?
La cromatografía de filtración...