Primera Sesi N

Primera sesión
Preparación de las muestras y cultivo en un medio selectivo
Contenido
I. Preparación de la zona estéril para el trabajo microbiológico
II. Cultivo de la muestra de agua en el medio Mc-Conkey
III. Manejo de material contaminado
Material y medios por equipo
Solicitar en el interlaboratorio de cristalería y reactivos
a) 4 Cajas de agar MacConkey
b) 1 Tubo estéril con tapón de roscao de algodoón de 16x150mm
c) 1 Pipeta estéril de 10 mL
d) 1 Propipeta o pipeteador manual
e) 1 Mechero
f) 1 Gradilla
g) 1 Pipeta Pasteur
h) 250mL de solución salina isotónica (SSI), estéril.
Solicitar en el interlaboratorio de equipo
1 Microscopio por equipo de trabajo
Cada equipo debe traer en esta sesión
A) Muestra de agua para el aislamiento de bacterias. En un frasco de vidrio incoloro deboca ancha y con tapón de rosca, colectar un volumen aproximado de 50Ml de agua de cualquiera de las siguientes fuentes: desagüe, riego de hortalizas, remojo de verduras, lavado de algún puesto de tacos, jugos, mariscos o tortas. El máximo tiempo transcurrido después de recolectar el agua, es de 6 horas y debe guardarse a 4° C
B) 2 Asas bacteriológicas
C) 5 Hisopos estériles
D) 6 Portaobjetos
E) 6Cubreobjetos
F) Cubrebocas
G) Cerillos o encendedor
H) Material para preparar zona estéril para trabajo microbiológico y para etiquetar muestras
Solución desinfectante preparada:
Traer cualquiera de las siguientes soluciones, perfectamente etiquetadas:
A) Hipoclorito de sodio al 10%: mezclar 100mL de hipoclorito de sodio (cloro comercial), con 900 mL de agua, envasar en frasco de plástico de bocaangosta muy bien cerrado con una tapa de rosca perfectamente etiquetado
B) Solución de benzal diluida 1:10 con agua y envasada en un frasco ámbar con tapón de rosca perfectamente etiquetado

I. Preparación de la zona estéril para el trabajo microbiológico
Una de las partes más importantes del trabajo microbiológico es realizar todos los procedimientos en una zona de trabajo estéril, ya que deesta manera se asegura que los microorganismos detectados provengan de muestras estudiadas y no se trate de la contaminación procedente del medio ambiente o de la propia persona que realiza el ensayo. Por lo que es necesario llevar a cabo una adecuada preparación de la zona de trabajo.
En general, el control de los microrganismos se puede llevar a cabo limitando el crecimiento microbiano, proceso deinhibición, o bien destruyendo los microorganismos por esterilización, que es la muerte o eliminación de todos los organismos de un medio. Los agentes que destruyen o matan a las bacterias son bactericidas, lo que inhiben el crecimiento bacteriano son bacteriostáticos.
Para realizar este control se utilizan métodos de esterilización o desinfección. Los métodos de esterilización o desinfección. Losmétodos de esterilización pueden ser físicos o químicos y deben garantizar la destrucción total de todos los microorganismos presentes en la sustancia o material esterilizado. La desinfección se realiza con agentes desinfectantes o antisépticos. Los desinfectantes son productos químicos que matan a los microorganismos y se utilizan sobre objetos inanimados. En cambio, los antisépticos sonsustancias químicas que matan o inhiben el crecimiento de los microrganismos y no son lo suficientemente tóxicos para ser aplicados a los tejidos vivos.
El calor es el método más utilizado para la esterilización y se puede emplear el calor seco o el calor húmedo. Para el primero se utilizan hornos y en el segundo autoclaves. Para esterilizar por calor seco se requiere una temperatura de 170° C por unahora, si la temperatura es menor en el tiempo aumenta. La esterilización se produce cuando el vapor de agua a presión que se genera, desnaturaliza los proteínas destruyendo los microorganismos. La esterilización en autoclave requiere una temperatura de 121° C a 15 libras de presión por pulgada, durante 20 min.
Procedimiento
Lava con agua y jabón en la superficie de la mesa laboratorio déjala...