Principales medios de cultivo y su preparacion
El estudio adecuado de las bacterias, exige como requisito previo, poder cultivarlas en condiciones de laboratorio. Para lograr esto, es preciso conocer, los elementos nutritivos para la obtención deenergía que será empleada para la biosíntesis y la reproducción celular y las condiciones físicas. Las exigencias nutritivas de las bacterias se han establecido después de dilatadas investigaciones, cuyos resultados han sido el desarrollo de numerosos medios de cultivo artificiales, estas necesidades nutritivas son muy diversas, debido a ello existen grandes diferencias.
Los medios de cultivo máscomunes utilizados son los que están constituidos con peptonas, extractos de carne o carne parcialmente digerida y extractos de levadura llamados también medios básales.
Cuando hay que utilizar medios sólidos, se agregan agar a los medios líquidos, como agente coagulante o solidificante. La preparación de los medios de cultivo, ha sido reemplazada en gran medida por el uso de medios de cultivodeshidratados a los cuales se les agrega agua destilada, tales medios son estables y bien estandarizados con respecto a pH y concentración de materiales.
El estudiante aprenderá las técnicas fundamentales empleadas para la transferencia y aislamiento de microorganismos.
Aplicar técnicas de aislamiento para la localización de microorganismos concretos en muestrascontaminadas.
Aplicar las técnicas del aséptico y las estrías como las más habituales en aislamiento de microorganismos cultivables.
El crecimiento de los microorganismos no se puede estudiar individualmente debido a su tamaño tan pequeño, por lo que es necesario recurrir a medios nutritivos artificiales, donde se puedan desarrollar rápidamente y producir grandes poblaciones.
Muchasespecies bacterianas son tan parecidas morfológicamente que es imposible diferenciarlas solo con el uso del microscopio; en este caso, para identificar cada tipo de bacteria, se estudian sus características bioquímicas sembrándolas en medios de cultivo especiales
Los materiales nutritivos donde se desarrollan y multiplican los microorganismos contienen los nutrientes necesarios para sucrecimiento, y se denominan medios de cultivo, cuyos componentes son muy variados.
MATERIALES FÍSICOS
Y EQUIPOS
MATRAZ
TUBOS DE ENSAYO CON CALDO NUTRITIVO
PIPETAS
CAJAS PETRI
ALGODÓN
ASA Y AGUJA DE INOCULAR.
MECHERO
MASKING TAPE
MUESTRA MIXTAS
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A. TECNICA ASÉPTICA.
Limpiar perfectamente ydesinfectar la mesa de trabajo con alcohol.
Lavarse las manos con jabón y después frotárselas con un algodón con alcohol.
Colocarse la mascarilla y los guantes quirúrgicos a fin de evitar contaminación al medio de cultivo.
Colocar los tubos y demás material en una posición adecuada en la que se puedan alcanzar sin dificultad y sin peligro de quemarse.
Trabajar siempre junto al mechero para laesterilidad a 20 cm.
Antes de realizar cualquier siembra, esterilizar el asa o aguja a fuego directo hasta el rojo vivo, enfriar cerca del mechero, sembrar y volver a esterilizar.
Durante la siembra deben permanecer cerradas las puertas y ventanas y no se debe hablar.
B. INOCULACIÓN DE MEDIOS LÍQUIDOS.
Coger con una mano el tubo que contenga el cultivo y otro con caldonutritivo.
Coger el asa y esterilizar al rojo vivo. Quitar los tampones del tubo.
Flamear los bordes de ambos tubos, introducir el asa al cultivo y tomar una pequeña muestra.
Introducir el inoculo dentro del tubo con el caldo y agitar el asa.
Retirar el asa, flamear nuevamente los bordes de los tubos y colocar los tampones.
Etiquetar y guardar a temperatura solicitada.
C. INOCULACIÓN DE...
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