Principio sobre diluciones

Universidad de Puerto Rico en Humacao
Departamento de Biología
Programa de Microbiología Aplicada

Unidad de Diluciones
Dr. Héctor L. Ayala del Río
Junio 2012
La detección y enumeración de microorganismos es un componente esencial de la
microbiología. Sin embargo, la mayoría de los métodos de enumeración requieren que
la carga microbiana de la muestra se encuentre dentro del rango deconfiabilidad del
método. Generalmente, las muestras analizadas tienen una carga microbiana mayor
que la permitida por el método. Es necesario diluir la muestra de manera que la carga
microbiana esté en el rango de confiabilidad del método. Entender los conceptos de
diluciones nos permitirá diluir de manera apropiada las muestras y poder calcular la
densidad de microorganismos en el cultivooriginal.

¿Qué es una dilución?
Una dilución se define como el acto de añadir un solvente a un soluto para reducir la
concentración del soluto. ¿Qué es el soluto? El soluto puede ser un compuesto
químico como la glucosa o un microorganismo como Escherichia coli. El principio en
ambos casos es el mismo, reducir la concentración (i.e. el número de moléculas de
glucosa o Escherichia coli porunidad de volumen). Esto lo logramos añadiendo más
solvente. El siguiente ejemplo ilustra el principio de diluciones:
Tenemos un tubo con 10 células en 2 ml de solvente. Le añadimos 3 ml de solvente
adicionales. ¿Cómo cambió la concentración de células en el tubo luego de añadirle el
solvente adicional?
Para poder contestar la pregunta es necesario
que calculemos la concentración de célulasantes y después de añadir los 3 ml de solvente.
La concentración de células antes de añadir el
solvente sería:

número de células 10 células
células
=
= 5
volumen
2 ml
ml

!

La concentración de células después de añadir 3 ml de solvente sería:
número de células 10 células 10 células
células
=
=
= 2
volumen
2 ml + 3 ml
5 ml
ml
Si observamos detenidamente el ejemplo, notaremosque la cantidad de células no
cambia a pesar de añadir más solvente, lo que cambia es la cantidad de solvente en
que se encuentran dichas células. Por consiguiente, el añadir más solvente disminuye
!
la cantidad de células por unidad de volumen.

Existen varias estrategias para diluir. En nuestros cursos de química aprendimos cómo
diluir soluciones de las cuales conocemos la concentraciónoriginal utilizando la
siguiente fórmula:

Ci "Vi = Cf "Vf
donde C = concentración, V = volumen, i = inicial, y f = final. Si despejamos esta
ecuación para que las concentraciones queden en un lado y los volúmenes en el otro
tendremos:

!

Ci Vf
=
Cf Vi
Esta igualdad nos indica que existirá una proporcionalidad entre las concentraciones
de las soluciones y los volúmenes de mezcla.Esta proporcionalidad es lo que
conocemos como el Factor de dilución.

!

Factores de dilución
El factor de dilución puede ser definido como una proporción que indica el número de
veces que hay que diluir el material original. Esta proporción nos indicará cuántas
partes de la muestra original hay que colocar en el total de partes de la mezcla.
Matemáticamente podemos calcular el factor dedilución utilizando volúmenes o
concentraciones:
Factor de dilución (FD) =

Ci Vf
=
Cf Vi

Si utilizamos la concentraciones del ejemplo anterior para calcular el Factor de Dilución
tendríamos:
!
5células ml
5
2.5
FD =
=
=
= 2.5
2células ml
2
1

!
Unidad de Diluciones

Dr. Ayala del Río

2

Esto quiere decir que para obtener una solución con 2 células/ml es necesariodiluir la
solución original 2.5 veces. Es importante notar que por ser una proporción los factores
de dilución no tienen unidades y siempre se describen como una razón de partes
totales a partes de soluto. Generalmente se expresarán como el recíproco:

FD =

1
Volumen de soluto
=
2.5 Volumen total de la solución

Por ser una proporción, es necesario que siempre expresemos los factores...