Probabilidad Y Estadistica Para Ingenieros - Walpole

DETERMINACION CUALITATIVA DE METABOLITOS
SECUNDARIOS
El cribado fitoquímico tiene como objetivo general la determinación cualitativa de
los principales grupos químicos presentes en la materia vegetal, y que por lo
general son los responsables de la actividad farmacológica. Las técnicas de
determinación más corrientemente utilizadas incluyen la presencia de alcaloides,
flavonoides, taninos,antracenos, esteroles insaturados, saponinas, grupos fenólicos

* FLAVONOIDES
Evaporar el equivalente a 5 gramos de material en una capsula de evaporar en baño
de maría.
Se trituró el residuo con 15 Ml de éter de petróleo y filtró. Se repitió con volúmenes
adicionales hasta que sea incoloro, descartando el extracto. Este método
selectivamente remueve materiales grasos solubles talescomo: pigmentos,
clorofila, resinas, etc., los cuales son solubles y retienen flavonoides, los cuales en
general no son solubles en éter de petróleo.
Posteriormente se disolvió el residuo desengrasado en 10 mL de etanol al 80% y se
filtró. Se colocó de 1 a 2 mL del filtrado en 3 tubos de ensayo, rotulando al tubo N°
1 como tubo control.

ENSAYO DE CIANIDINA
Al tubo N° 2 añadir 0.5 mL de ácidoclorhídrico concentrado y 3-4 virutas de
magnesio. Observar la formación de color de (Vede a rojo) al cabo de 10 min.
De haber cambio de color con respecto al tubo control, enfriar y diluir con
volúmenes iguales de agua y añada 1 mL de alcohol octilico. Agite y espere que se
separe.
El desarrollo de tonalidades rojizas en la capa de octanol es indicativo de
flavonoides.

ENSAYO DELEUCOANTOCIANIDINA.
Al tubo N° 3 añadir 0.5 mL de ácido clorhídrico concentrado Y calentar en baño
María por 5 min. El desarrollo de un color violeta es indicativo de la presencia de
leucoantocininas.

* ANTRACENOS.

ENSAYO DE BORNTRAGER
Evaporar, el extracto equivalente a 1 gramo de material vegetal hasta sequedad
usando Rotavapor. Disolver el residuo 10 mL de agua destilada y filtrar.Agitar el
filtrado con 10 mL de tolueno, en embudo de separación y dejar que se separe.
Transferir la capa de tolueno a un tubo de ensayo añadir 5 mL de amoniaco y
agitar. Observar cambios de color en la capa alcalina, la producción de un color
rosado a rojo indica presencia de compuestos antracenicos.

* TANINOS

ENSAYO DE LA GELATINA
Evaporar extracto equivalente a 10 gramos de plantahasta sequedad en rotavapor.
Al residuo añadir 10 mL de agua destilada caliente. Agitar bien con varilla de
vidrio y dejar enfriar a temperatura ambiente. Se añadió 3 a 4 gotas de NaCl al 10%
para salar y precipitar cualquier compuesto no tanino y así evitar resultados falsos
positivos. Filtrar y dividir en 4 tubos el tubo uno sirve de control.

Al tubo 2 añadir 4-5 gotas de gelatina al 1%, laformación de un precipitado es
indicativo de presencia de taninos.
Al tubo 3 2 añadir 4-5 gotas de gelatina al 1% más NaCl, la formación de un
precipitado más abundante que el primero es indicativo de presencia de taninos
Al tubo 4 añadir 3-4 gotas de FeCl3 5%. La aparición de colores negro a azul es
indicativo de anillo pirogalol, y grisáceo a negro es indicativo de la presencia de
catecol.La ausencia de precipitados con gelatina y la aparición de colores con
FeCl3 es indicativo de compuestos fenolicos tipo no taninos.

* TERPENOS-DETERMINACION CUALTITATIVA DE
SAPONINAS Y ESTEROLES INSATURADOS.

ENSAYO DE ESPUMA.
A 1 gramo de material vegetal seco se añadió agua destilada hasta 1cm sobre el
nivel del material.
Agitar fuertemente durante 30 segundos y dejar humedecer porunos 10 minutos,
luego agitar durante 30 segundos. Dejar reposar por 3 minutos, la formación y
persistencia de espuma es indicativo de la presencia de saponinas

ENSAYO PARA ESTEROLES.
Se evaporó el equivalente a 10 g de material hasta sequedad en rotavapor. Se
añadió 10 mL de éter de petróleo al residuo, revolver por pocos minutos. Dejar
sedimentar, decantar y descartar el sobrenadante....