procesamiento








TINCIONES SELECTIVAS DIFERENCIALES

















SERGIO FARITH ZAPATA TROCHES

TECNOLOGIA EN PROCESOS DE ALIMENTOS


Docente: ANA GOMEZ









FUNDACION UNIVERSITARIA AREA ANDINA
CONVENIO SENA
BOGOTA
JUNIO 2014



Tinciones

El microscopio de campo claro es más útil para la observación de especímenes teñidos. Los colorantes soncompuestos químicos utilizados para aumentar el contraste. Existen algunos, llamados colorantes vitales, que pueden añadirse directamente a una preparación en fresco; por tanto, colorean células vivas. No obstante, la mayoría de los colorantes son solamente efectivos después de que los microorganismos hayan sido fijados, es decir, se encuentren muertos y adheridos al portaobjetos. Para la fijación porcalor, se realiza una fina extensión de una gota de muestra líquida sobre un portaobjetos y se deja secar al aire; a continuación, se pasa la preparación de Forma rápida sobre la llama de un mechero. El calor de la llama mata las células microbianas por desnaturalización de sus proteínas. Las proteínas coaguladas unen las células al porta. Cuando se desea fijar especímenes delicados se utiliza lafijación química, va que es menos lesiva que el calor. Para ello se añade una gota del fijador, por ejemplo, ácido ósmico, formaldehido, o glutaraldehído, sobre la muestra líquida con los microorganismos.

Algunos colorantes precipitan y se disuelven en componentes celulares, como el negro de Sudan que es liposoluble y permite distinguir los glóbulos de grasa.

La fijación posee algunosinconvenientes. Por ejemplo, a menudo distorsiona la apariencia real de las células, lo cual dificulta la identificación; además, no permite la observación del movimiento de los microorganismos. Después de la fijación, se añade el colorante, que debe permanecer el tiempo suficiente en contacto con el espécimen, para que pueda ser absorbido. A continuación, se retira el exceso de colorante, normalmentelavando con agua.

Tipos de colorantes 

Casi todos los colorantes son sales, compuestos formados por iones cargados. Los colorantes básicos son aquellos en los cuales el agente que tiñe es el ion cargado positivamente, mientras que en los ácidos, el colorante es el ion cargado negativamente. Los colorantes más utilizados son los de tipo básico, va que la mayor parte de las células microbianasPoseen cargas débilmente negativas en su superficie, lo cual facilita su unión. Entre los colorantes básicos más comunes se encuentran la safranina, la fucsina básica, el cristal violeta y el azul de metileno. Los colorantes ácidos se unen a las partes de las células cargadas positivamente.

Se utilizan para teñir tejidos animales infectados con microorganismos. Entre los más frecuentes están laeosina, la fucsina ácida y el rojo Congo.

La aplicación de diferentes colorantes según sus propiedades y las combinaciones de colorantes, mordentes y decolorantes, han permitido desarrollar tinciones que puedan agruparse en;

Tinciones simples
Tinciones  diferenciales
Tinciones selectivas.

Las Tinciones simples: consisten en aplicar un solo colorante a a la preparación para observar lamorfología de los microorganismos. Se usan principalmente colorantes básicos como el azul de metileno, cristal violeta o safranina

Las Tinciones diferenciales: consisten  en aplicar una combinación de colorantes, mordentes y decolorantes que permitan poner de manifiesto alguna diferencia importante en la composición de los microorganismos. De este modo, se pueden distinguir microorganismos queaun cuando tengan igual morfología, presenten diferencias en su composición química. Las dos tinciones diferenciales  más importantes que se aplican a la bacteriología son:

Gram
Ziehl - Neslsen

Las Tinciones selectivas: Son aquellas que permiten observar un organelo celular determinado, pr que el colorante se combina selectivamente con el; en algunos casos, se requieren mordentes, agentes...