Procesos Celulares Fundamentales De Los Seres Vivos

Primera cesión
*preparación de las muestras y cultivo en un medio selectivo*
Objetivo: que el alumno aprenda a preparar la muestra y a sembrar por estría cruzada para obtener colonias aisladas.
Material y medios por equipo:
A)4 cajas de agar macConkey
B)1 Tubo estéril con tapón de rosca o de algodón de 16X15mm
C)1 pipeta estéril de 10 ml
D)2 Pipetas estériles de 1 ml
E)1 propipeta opipeteador manual
F)1 Mechero
G)1 Gradilla
H)1 Pipeta Pasteur
I)250 ml de solución salina isotónica (SSI),estéril.
Material por equipo:
A) Muestra de agua para el aislamiento de bacterias. En un frasco de vidrio incoloro de boca ancha y con tapón de rosca colectar un volumen aproximado de 50ml de agua de cualquiera de las siguientes fuentes: desagüe, riego de hortalizas remojo de verduras ,de algún puesto de tacos, etc.
B) 2 asas bacteriológicas
C) 5hisotopos estériles
D) 6 porta objetos
E) 6 cubreobjetos
F) Cubre bocas
G) Cerillos o encendedor
H) Material para preparar la zona estéril para trabajo microbiológico y para etiquetar las muestras.
Método:
1.- Preparamos la zona estéril para el trabajo microbiológico, para esto se utiliza alcohol al 70%que funciona como agente desinfectante. Roseamos un poco de dicho alcohol en la mesa y después lo frotamos con “sanitas” para que se lleve a cavo una buena desinfección.
2.- Cultivo de la muestra de agua en el medio MacConkey
A) Etiquetar el tubo de 16x 15 mm estéril con tapón de algodón.
B) Se agita vigorosamente el frasco con la muestras.
C) Se prepara la disolución 1:10 del agua con ayuda depipetas
D) Se agita unas 5 veces procurando que el tapón no se moje.
3.- Siembra del agua y sus disoluciones en el medio MacConkey
A)Se humedece la puta de algodón de un isotopo estéril con la muestra y descargar su contenido en forma circular forma circular cerca de un borde de la caja de MacConkey..
B)Se esteriliza el asa Bacteriológica calentándola al rojo vivo en la flama del mechero,para enfriarla , se sumerge dicha asa en el borde del agar durante unos segundos y una vez fría se procede a estriar el inocuo en el primer cuadrante de la caja de MacConkey.
C) Se repite el mismo procedimiento hasta que se cubren cuatro cuadrantes y al final se tiene que formar con l asa bacteriológica una estría abierta en el centro de la caja y después esterilizar el asa.
D) Se coloca la tapay se fija a la base de la caja con dos pedacitos de masking colocándolos en extremos opuestos.
E) Las muestras van por duplicado.
F) Poner las etiquetas a las cajas señalando el grupo, turno, No de equipo y fecha.
G) Se guardan las Cajas de agar MacConkey con la tapa hacia abajo en la estufa, para dejarlas incubar a 37°C durante 24 horas.
H) Por ultimo se desinfecta el material que fueutilizado, enjuagando las pipetas que se utilizaron y desechando los isotopos y todo el material desechable contaminado; envolviéndolo con papel de estraza, para posteriormente colocarlo en una bolsa roja de desecho.
I) Antes de dejar el laboratorio se desinfecta con alcohol al 70% las mesas en las que estuvimos trabajando para evitar algún contagio por eterobacterias.

Segunda Sesión
Aislamiento yobservación de las características macroscópicas y microscópicas de las enterobacterias.
Material:
A) 2 cajas de agar MacConkey
B) 1 mechero
C) 1 Matraz con solución salina isotónica estéril
D) 2 juegos para tinción de Gram: cristal violeta , lugol,alcohol-acetona,safranina.
E) 1 puente para tinción
F) 1 Franco gotero con aceite de inmersión.
G) 1 pipeta pasteurestéril
1 Microscopio por equipo
Material por equipo:
A) 1 asa bacteriológica
B) Toallas de papel secante
C) 10 porta objetos
D) 10 cubreobjetos
E) Cerillos o encendedor
F) Material para preparar zona estéril
Método:

1.- Selección de las colonias desarrolladas en agar MacConkey.
A) desinfectar el área en la que se va a trabajar roseando alcohol al 70% ; frotar con la...