Produccion De Invertasa
Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnología.
Práctica 6. Producción de invertasa con Saccharomyces cerevisiae.
Equipo 2.
Práctica 6. Producciónde invertasa con Saccharomyces cerevisiae.
Objetivo general.
* Adquirir los conocimientos prácticos para producir una enzima extracelular por medio de una fermentación con células libres enmedio líquido.
Objetivos específicos.
* Producir invertasa con células libres de levaduras en cultivo sumergido.
* Monitorear y obtener la cinética de crecimiento de biomasa.
*Monitorear y obtener la cinética de producción de enzima.
* Determinar la actividad catalítica de la invertasa.
* Establecer las constantes cinéticas (Km, V máx.) de la invertasa.Introducción.
Invertasa (β-fructofuranosidasa).
La invertasa o β-fructofuranosidasa es una enzima que cataliza la hidrólisis de sacarosa en fructosa y glucosa.
Las enzimas del tipo de la invertasa seencuentran presenten en el organismo de las abejas y en algunas levaduras.
Saccharomyces cerevisiae.
La levadura Saccharomyces cerevisiae es un hongo ascomiceto que ha sido ampliamente estudiadodada su importancia en la industria panadera y vitivinícola, así como por su capacidad de producir etanol.
Entre los azúcares que puede utilizar están monosacáridos como la glucosa, fructosa,manosa y galactosa, entre otros.
También son capaces de utilizar disacáridos como la maltosa y la sacarosa. Uno de los azúcares que no puede metabolizar es la lactosa.
Resultados.
Tabla 1.Absorbancias obtenidas para los ensayos de DNS, Bradford y Antrona.
Muestra | DNS | Bradford | Antrona | |
| Absorbancia a 540 nm. | Abs. a 595 nm. | Abs. a 650 nm. | pH | D.O a 600 nm. |
| 1minuto | 5 minutos | | | | |
08:28 | 0.670 | 0.459 | 0.655 | 0.213 | 5 | |
| 0.440 | 0.460 | 0.796 | 0.977 | | |
10:06 | 0.306 | 0.475 | 0.292 | 0.732 | 4.85 | 0.107 |
| 0.402 | 0.585...
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