produccion de tumor xenografico

Objetivo de estudios con xenogramas
Existen varios propósitos para la realización de un estudio xenográfico:
• Estudio de la captación de nuevas moléculas en desarrollo marcadas con emisores depositrones (estudios in vivo)
• Estudios in vitro o ex vivo (autorradiografía)
• Estudio del efecto de un tratamiento determinado en relación al tamaño o captación de trazador
• El alcance ypropósito de estudios xenográficos se decidirá antes de su preparación.



Se tendrá en cuenta:
• Tamaño del tumor
• Número de animales requeridos
• Por qué vía se inyectarán las células, s/c, i/v,i/p, etc.
• En caso de inyección s/c donde será inyectada, pata delantera, patas traseras, cuello, etc.
Todo se registrará en la planilla correspondiente a la producción y control de tumoresxenográficos (RE-BM-008-01).

5.2. Preparación de la suspensión celular
Se debe preparar una suspensión de las células a inocular en el número deseado (por ejemplo, 10 millones/mL) en su propio medio decultivo sin agregado de antibióticos o suero y mantener en hielo hasta ser inyectada al animal. (Ver PO-BM-003-01).
El tiempo entre la preparación y la inyección debe mantenerse al mínimo. Si se debeinyectar un número grande de animales (> 30) es mejor hacerlo en grupos.
El número de células que debe contener esta suspensión dependerá de la cantidad que se quiera inocular por animal (porejemplo 2.500.000 de células) y del número de animales a inocular. Para un ratón se debe inocular un volumen del entorno de 100 uL (volumen a inyectar). Para ello, una vez suspendidas las células en elfrasco de cultivo, se debe tomar una muestra de 10 uL para realizar el conteo del número de células por mL que existe en esa suspensión. En base a este resultado se calcula por regla de 3 el volumen desuspensión que se necesita tomar para contar con la cantidad de células totales requeridas de acuerdo a cuantos animales/inoculaciones estén previstas realizar. Para este cálculo siempre se toma un...