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ELECTROFORESIS

La electroforesis es un método de separación de mezclas de moléculas biológicas. Cuando una mezcla de moléculas ionizadas y con carga neta son colocadas en un campo eléctrico, estasexperimentan una fuerza de atracción hacia el polo que posee carga opuesta.
La electroforesis en gel es una técnica empleada por los científicos para separar moléculas basándose en propiedades comoel tamaño, la forma o el punto isoeléctrico.
La electroforesis en gel se utiliza generalmente con propósitos analíticos, pero puede ser una técnica preparativa para purificar moléculas parcialmenteantes de aplicar espectrometría de masas, PCR, clonación o secuenciación de ADN.
La electroforesis en gel se utiliza en biología molecular, genética y bioquímica:
• La electroforesis en gel demuestras grandes de ADN y ARN se efectúa en geles de agarosa.
La electroforesis de proteínas se lleva a cabo en geles de poliacrilamida-SDS (SDS-PAGE), isoelectroenfoque, geles nativos o electroforesisbidimensional
Un DNA lineal se mueve en un gel de agarosa a una velocidad que es dependiente del tamaño del poro del gel. A mayor concentración de agarosa, menor diámetro de poro y menor movilidad.La movilidad electroforética de los fragmentos de DNA es inversamente proporcional al logaritmo de su tamaño, expresado en pares de bases.
PREPARACIÓN DEL GEL
La Agarosa es un polisacárido extraídode algas marinas, no tóxico. Generalmente se usa en concentraciones de 0,5 a 2%. Cuanto mayor sea la concentración de agarosa mas "rígido" es el gel. Geles de agarosa son muy fáciles de preparar: sólotiene que mezclar polvo de agarosa con la solución tampón, para mantener más o menos constante el pH, se derriten por calor, generalmente en un microonda, se enfría un poco y comúnmente, el bromurode etidio se añade a la concentración del gel (final de 0.5 ug / ml) en este punto para facilitar la visualización de ADN después de la electroforesis, posteriormente se vierte la solución en el...