Prolina

PROTOCOLO DE EXTRACCIÓN Y CUANTIFICACIÓN DE PROLINA LIBRE
(Gilmour et al., 2000 - Troll and Lindsley, 1955)
Introduccion

|La prolina es un aminoácido que se encuentra en pequeñas cantidades en las plantas, cuando éstas crecen en condiciones óptimas. En |
|condiciones de estrés, se ha encontrado que el contenido de prolina aumenta para actuar como un agente osmótico, protegiendo a la ||planta de la deshidratación. Muchas especies de plantas acumulan prolina libre en respuesta a la salinidad (Jiménez-Bremont et al., |
|2006; Tajdoost et al., 2007), sequia (Avendaño et al., 2005) y frio ( Konstantinova et al., 2002). Se ha sugerido que la prolina |
|participa en múltiples roles en la tolerancia de las plantas al estrés; actuando como un mediador del ajuste osmótico(Delauney & |
|Verma 1993; Kavi Kishor et al. 1995; Yoshiba et al. 1997), estabilizador de proteínas y membranas, inductor de genes relacionados a |
|estrés osmótico (Iyer & Caplan 1998), fuente de carbono y nitrógeno fácilmente disponible en la rehidratación celular (Brugière et |
|al. 1999), fuente de equivalentes de reducción (del catabolismo de prolina) para sostener la fosforilaciónoxidativa y la generación |
|de ATP durante la recuperación del estrés (Hare & Cress 1997; Hare et al., 1998). Además, ayuda al control de la acidosis del |
|citosol y puede mantener la relación NADH/NAD+ a valores compatibles con el metabolismo (Hare & Cress 1997); en la detoxificación del|
|exceso de NH4+ y ayuda a las células a superar la tensión oxidativa (cosechador de especies reactivasde oxígeno). (Ramanjulu & |
|Sudhakar, 2000; Harsh, 2003).La prolina es un aminoácido que se encuentra en pequeñas cantidades en las plantas, cuando éstas crecen |
|en condiciones óptimas. En condiciones de estrés, se ha encontrado que el contenido de prolina aumenta para actuar como un agente |
|osmótico, protegiendo a la planta de la deshidratación. Muchas especies de plantas acumulanprolina libre en respuesta a la salinidad|
|(Jiménez-Bremont et al., 2006; Tajdoost et al., 2007), sequia (Avendaño et al., 2005) y frio ( Konstantinova et al., 2002). Se ha |
|sugerido que la prolina participa en múltiples roles en la tolerancia de las plantas al estrés; actuando como un mediador del ajuste |
|osmótico (Delauney & Verma 1993; Kavi Kishor et al. 1995; Yoshiba et al. 1997),estabilizador de proteínas y membranas, inductor de |
|genes relacionados a estrés osmótico (Iyer & Caplan 1998), fuente de carbono y nitrógeno fácilmente disponible en la rehidratación |
|celular (Brugière et al. 1999), fuente de equivalentes de reducción (del catabolismo de prolina) para sostener la fosforilación |
|oxidativa y la generación de ATP durante la recuperación del estrés(Hare & Cress 1997; Hare et al., 1998). Además, ayuda al |
|control de la acidosis del citosol y puede mantener la relación NADH/NAD+ a valores compatibles con el metabolismo (Hare & Cress |
|1997); en la detoxificación del exceso de NH4+ y ayuda a las células a superar la tensión oxidativa (cosechador de especies reactivas|
|de oxígeno). (Ramanjulu & Sudhakar, 2000; Harsh, 2003).|
|En plantas superiores, Pro se sintetiza a través a partir de la vía de ácido Glutámico (Glu) y Ornitina (Orn).En la vía Glu (Fig. 1),|
|Pro es sintetizada a partir de Glu a través de dos intermediarios, glutámico-γ-semialdehído (GSA) y Δ 1-pirrolina-5-carboxilato |
|(P5C). Dos enzimas catalizan esta vía, P5Csintetasa (P5CS) en el primer paso y P5C reductasa (P5CR) en la etapa final. Los genes que|
|codifican P5CS y P5CR se han aislado de varias plantas, y su expresión y las funciones de sus productos han sido caracterizadas. Como|
|resultado, se ha demostrado que P5CS es la enzima limitante en la biosíntesis de Pro en las plantas superiores. Por otro lado, Pro |
|se metaboliza a través de Glu P5C...