Propagacion clonal

Páginas: 7 (1670 palabras) Publicado: 16 de agosto de 2013
Propagación clonal in vitro de Anthurium (Anthurium andraeanum L.) Usando Cultivo de Callos
Abstracto
una alta frecuencia de callos se obtuvieron a partir de las hojas y espádices segmentados de
Anthurium andraeanum L. cuando se cultivan en medio N6 que contiene 2,5 mg / l de BAP y 0,2 mg / l de 2,4-D en condiciones de oscuridad. Los callos se mantuvieron en condiciones de oscuridad en elmismo medio que contiene mismos suplementos hormonales mediante subcultivo hasta tres meses, pero sin formación de brotes durante este período. Segmentos de la hoja y el espádice derivados del callo fueron probados por múltiples regeneración de brotes en el cultivo en MS enriquecido con BAP y Kn solos o en combinación con NAA en condiciones de poca luz. Se observó mejor respuesta hacia laregeneración de brotes múltiples de ambos segmentos de hojas y espádice derivados callos en MS enriquecido con 1,0 mg / l de BAP. En esta combinación de un promedio de 18 brotes regenerados a partir de la hoja de segmento callo derivado, mientras que 14 brotes se regeneraron a partir de espádices segmentados del callo derivado. El número de brotes aumentó de tres a cuatro pliegues después de subcultivos enel mismo medio. Regenerados múltiples brotes se extirparon y se cultivaron en medio MS de fuerza con diferentes concentraciones de IBA y AIA para la inducción de la raíz. Mejor desarrollo radicular se obtuvo en el medio MS de fuerza que contiene 1,0 mg / l de IBA. Alrededor del 85 por ciento de las plántulas regeneradas sobrevivieron en condiciones naturales.

Materiales y Métodos
Las plantasAnthurium de tres o cuatro meses edad (Anthurium andraeanum L.) se obtuvieron de vivero local y conservan en el jardín experimental del Instituto para la obtención de explantes. Segmentos de la hoja y el espádice se utilizaron como fuente de explante inicial. Después de la recogida de estos explantes de jardín experimental, éstas se lavaron a fondo con agua corriente durante 30 min y después setrataron con 0,5% (v / v) de Trix (detergente comercial, Reckitt Benckiser Bangladesh Ltd.) seguido de lavado cinco veces con agua destilada agua. Luego 63 se esterilizaron superficialmente durante 1 min en etanol al 70%, 8 min en 1,5% de hipoclorito de sodio en la que se añadió 0,01% de Tween-20 como agentes tensioactivos.
Los explantes se cortaron en trozos más pequeños y se colocan en a medio N6para la inducción de callo. Callos verdoso que se obtiene a partir de estos dos tipos de explantes fueron utilizados para la regeneración de brotes múltiples. La composición de los medios siguientes se utilizó en los pasos individuales de la regeneración de plantas. Medio de inducción de callo (SMC): medio de Nistch suplementado con diferentes concentraciones de BAP y 2iP (0,5 - 2,5 mg / l),solos o en combinación con 0,2 mg / l de 2,4-D se utiliza para la inducción de callo en condiciones de oscuridad. Dispara medio de multiplicación (SMM): MS enriquecido con diferentes concentraciones (0,2 -1,5 mg / l) de BAP y Kn solos o en combinación con 0,5 mg / l de NAA se utiliza para la regeneración de brotes múltiples desplazando el callo de la oscuridad a condición de luz. Medio inductor deraíz (RIM): La mitad de la fuerza MS suplementado con diferentes concentraciones de IBA y AIA (0,2 a 2,0 mg / l) se utiliza para la iniciación de las raíces cultivadas in vitro en múltiples brotes. Para la inducción de callo y mantenimiento, los cultivos se almacenan en condiciones de oscuridad continua durante tres meses. Para todos los experimentos, el pH del medio se ajustó a 5,8 y se solidificóen un 0,4% de fitagel y se dispensa en recipientes de cultivo. Los recipientes de cultivo con medio A continuación, se trataron en autoclave a 121 º C y a 1,05 kg/cm2 de presión durante 20 min. Después de la inoculación, los cultivos se mantuvieron en una cámara de crecimiento con fotoperíodo de 16 horas con una intensidad de luz de 2000 lux (aprox.) de la luz del tubo fluorescente blanco y a...
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