Propagacion masiva de brotes in vitro a partir de embriones de pseudotsuga menziesii

UNIVERSIDAD JUAREZ DEL ESTADO DE DURANGO

2011
PROPAGACION MASIVA DE BROTES in vitro A PARTIR DE EMBRIONES DE Pseudotsuga menziesii
FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS
DIANA PALOMA GANDARA AMEZCUA



I N D I C E.
I N D I C E. 2
Resumen 4
I. Introduccion 5
Ii. Planteamiento Del Problema. 6
Iii. Objetivos 7
Objetivo General. 7
Objetivos Especificos. 7
Iv. Hipotesis 8Ho 8
V. Justificacion 9
Iv. Revision De La Literatura. 10
6.1. Descripcion De La Especie 10
6.1.1 Caracteristicas Morfologicas De La Especie 10
5.1.2 Descripcion Morfologica De La Semilla 10
5.1.3 Usos 11
5.1.4 Distribucion Geografica 11
6.2. Metodos De Mejoramiento Genetico 11
6.2.1 Ensayo De Especies Y Procedencias 12
6.3 Tratamientos Para Acelerar La Germinacion De LaSemilla. 12
6.4 El Cultivo De Tejidos En Especies Forestales. 13
6.4.1 El Proceso De Diferenciacion En El Cultivo De Tejidos 13
6.4.2 Las Ventajas Del Cultivo De Tejidos 14
6.5 Los Medios De Cultivo En Especies Forestales. 14
6.6. Trabajos Que Se Han Realisado En El Cultivo De Tejidos De Pseudotsuga Menziesii. 15
Vii. Materiales Y Metodos 17
7.1 Aspectos Generales. 17
7.1.1Localización. 17
7.1.2. Caracteristicas Del Material Biologico. 17
7.2. Pretratamiento De La Semilla. 17
7.2.1 Pretratamiento De La Semilla En Frio. 17
7.3. Extraccion Y Establecimiento Del Explante En El Medio De Cultivo. 18
7.4 Descripcion De Las Etapas. 19
7.4.1 Etapa De Establecimiento 19
Figura 1. 19
(A) (B) 20
7.4.2 Etapa De Elongacion Del Brote 20
1.- Primera Transferencia 202.- Segunda Transferencia 20
7.4.3. Etapa De Enraizado 21
Viii. Resultados 22
Analisis De Varianza 23
Pruebas De Tukey 25
Ix. Discusion 27
X. Conclusiones 29
Xi. Bibliografia 30

RESUMEN
En esta investigación el principal objetivo fue establecer una metodología para la producción del mayor número de brotes a partir de embriones de Pseudotsuga menziesii.
Los embriones sesembraron en frascos tipo “Gerber”, conteniendo 25ml. Del medio de Murashige y Skoog (1962). En la etapa de establecimiento de este trabajo se evaluó el efecto de las citocininas (0.1, 0.3 y 3.0 mg/l) y sales minerales (25, 50, 75 y 100 %), observándose a consecuencia de la variación de las concentraciones de los diferentes tratamientos dos respuestas morfo genéticas con diferente intensidad: la formaciónde callo y la formación de brotes adventicios. Confirmando en los análisis estadísticos, que los mejores tratamientos fueron los de la concentración de 3.0mg/l de benciladenina con 25 y 75% de sales minerales.
La etapa de elongación de brotes se compone de dos subetapas básicas. En la primera de ellas (1ª. Transferencia), la masa de células obtenida en la primera etapa se establece parapropiciar una mayor diferenciación de las yemas adventicias que se han formado, permaneciendo aquí un tiempo de 4 semanas, suficiente para que el brote alcance una altura de 5 mm. En la segunda subetapa (2ª. Transferencia), los brotes se seccionaron de manera individual, y se depositaron en un medio fresco para lograr su elongación final en las 4 semanas siguientes, hasta llegar a tener una altura de15mm, para después ser transferidos a la etapa de enraizado. El medio utilizado en esta etapa fue el de Gresshoff y Doy (1972) al 50% de su concentración, adicionado con las mismas vitaminas del medio de Murashige y Skoog (1962), en ausencia de hormonas de crecimiento.
La etapa de enraizado consta de 3 tratamientos elaborados con el medio nutritivo de Gresshoff y Doy (1972) al 50% de suconcentración, adicionando con 0.5 mg/l de Acido naftalenacético (ANA) para cada tratamiento; 0, 0.25 y 0.5 mg/l de Acido indolbutírico (AIB) y 0.01, 0.01 y 0.01mg/l de Benciladenina (BA), aquí permanecieron durante 2 semanas para propiciar la formación de un pequeño callo en la base del brote, transcurrido este tiempo se transfirieron a un medio fresco de Gresshoff y Doy (1972) al 50% de su concentración,...