PROPIEDADES CUALITATIVAS DE LOS AMINOÁCIDOS

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA BÁSICA
PRÁCTICA No. 4 IDENTIFICACIÓN CUALITATIVA DE AMINOÁCIDOS

OBJETIVO
Al término de ésta práctica identificaremos la diferencia y particularidad de los aminoácidos utilizando las técnicas colorimétricas más comunes para su determinación.
RESULTADOS
Los métodos colorimétricos de determinación de aminoácidos se basan en la reacción específica de éstos condeterminados compuestos, dando derivados coloreados. La formación de color se toma como resultado positivo e indica su presencia, mientras que el no desarrollo de color es indicativo de que no está presente. En la siguiente tabla se muestran los resultados de las pruebas cualitativas para aminoácidos:
Pruebas Cualitativas Para Aminoácidos
Prueba Bioquímica
Sustancia Ensayada
Resultado
NinhidrinaAgua Destilada
Negativo
Xantoprotéica
Agua Destilada
Negativo
Millon
Agua Destilada
Negativo
Hopkins Cole
Agua Destilada
Negativo
Nitroprusiato
Agua Destilada
Negativo
Ninhidrina
Extracto De Frijol
Negativo
Xantoprotéica
Extracto De Frijol
Negativo
Millon
Extracto De Frijol
Negativo
Hopkins Cole
Extracto De Frijol
Negativo
Nitroprusiato
Extracto De Frijol
PositivoNinhidrina
Glicina
Positivo
Xantoprotéica
Fenilalanina
Positivo
Millon
Tirosina
Positivo
Hopkins Cole
Triptófano
Positivo
Nitroprusiato
Cisteína
Positivo
Ninhidrina
Cotiledones
Positivo
Xantoprotéica
Cotiledones
Positivo
Millon
Cotiledones
Positivo
Hopkins Cole
Cotiledones
Positivo
Nitroprusiato
Cotiledones
Positivo

DATOS Y OBSERVACIONES EXPERIMENTALES
El contenido deproteínas en nuestro material biológico (frijol) varia del 14 al 33%, siendo rico en aminoácidos como la lisina (6.4 a 7.6 g/100 g de proteína) y la fenilalanina más tirosina (5.3 a 8.2 g/100 g de proteína), pero con deficiencias en los aminoácidos azufrados de metionina y cisteína. Conociendo estos datos, a continuación y conforme a los resultados de las pruebas cualitativas de los aminoácidos semuestran las reacciones presentes durante la experimentación, de acuerdo al resultado de nuestra prueba bioquímica con nuestra sustancia ensayada:




PRUEBA 1: REACCIÓN DE LA NINHIDRINA


Sirve para conocer y valorar cuantitativamente a los aminoácidos. La Ninhidrina en presencia de aminoácidos alfa se torna en color azul a azul violeta, en este caso la solución Ninhidrina más aminoácidoglicina, luego de someterla a calor, tornó a color azul. Los aminoácidos son descarboxilados por oxidación, formando amoniaco más CO2 y un aldehído.
PRUEBA 2: REACCIÓN XANTOPROTEICA


La solución proteica y el aminoácido tirosina toman un color amarillo, esto se debe a la formación de un compuesto aromático nitrado, además demuestra que es una proteína con aminoácidos que lleva el anillobencénico (aromático). El color amarillo se intensifica en medio alcalino. Esta reacción es la que provoca el color amarillo cuando se salpica la piel con ácido Nítrico concentrado, las proteínas de la piel tienen Tirosina y Triptófano, los cuales al nitrarse, le dan a la piel un color amarillo característico.
PRUEBA 3: REACCIÓN DE MILLON

El primer paso de la reacción de Millon consiste en lanitración del anillo fenólico de la Tirosina, por el ácido Nítrico del reactivo. La Tirosina nitrada forma complejos con los iones Mercuroso Hg(I) y Mercúrico Hg(II) del reactivo produciendo un precipitado rojo o una solución roja, ambos resultados positivos. La proteína en nuestro material biológico primero formo un precipitado blanco, por lo que se calentó para que así nos diera el color rojoindicativo de la presencia de Tirosina.

PRUEBA 4: REACCIÓN DE HOPKINS COLE





Es específica del grupo indol característico del Triptófano. El anillo del indol se hace reaccionar con ácido Glioxálico en presencia de ácido Sulfúrico concentrado para formar un compuesto violeta que se forma en la interfase entre la solución de proteína y el ácido sulfúrico. La reacción de Hopkins Cole es...