Proteina

RECONOCIMIENTO DE PROTIDOS

MATERIALES

• Tubos de ensayo
• Gradilla
• Mechero
• Vasos de precipitados
• Pipetas
• Solución de HCl concentrado
• Alcohol etílico• Solución de SO4Cu al 1%
• NaOH al 20%
• Clara de huevo o leche
• Solución de albúmina al1-2%

1. COAGULACIÓN DE LAS PROTEÍNAS
     FUNDAMENTO
Las proteínas debido al grantamaño de sus moléculas forman con el agua soluciones coloidales que pueden precipitar formándose coágulos al ser calentadas a temperaturas superiores a 70ºC o al ser tratadas con soluciones salinas,ácidos, alcohol, etc.
La coagulación de las proteínas es un proceso irreversible y se debe a su desnaturalización por los agentes indicados que al actuar sobre la proteína la desordenan por destrucciónde sus estructuras secundaria y terciaria.
     TÉCNICA
1. Colocar en tres tubos de ensayo una pequeña cantidad de clara de huevo (puede diluirse en un poco de agua para obtener una mezcla espesa)o 2-3ml de leche.
2. Calentar uno de los tubos al baño María, añadir a otro 2-3ml de HCl concentrado y al tercero 2 o 3ml de alcohol etílico.
3. Observar los resultados.
2. REACCIONESCOLOREADAS ESPECÍFICAS (BIURET)
     FUNDAMENTO
Entre las reacciones coloreadas específicas de las proteínas, que sirven por tanto para su identificación, destaca la reacción del Biuret. Esta reacción laproducen los péptidos y las proteínas, pero no los aminoácidos ya que se debe a la presencia del enlace peptídico CO-NH que se destruye al liberarse los aminoácidos.
El reactivo del Biuret llevasulfato de Cobre(II) y sosa, y el Cu, en un medio fuertemente alcalino, se coordina con los enlaces peptídicos formando un complejo de color violeta (Biuret) cuya intensidad de color depende de laconcentración de proteínas.
     

TÉCNICA
1. Colocar en un tubo de ensayo 3ml de solución de albúmina al 1-2%.
2. Añadir 4-5 gotas de solución de SO4Cu al 1%.
3. Añadir 3ml de solución de...