Proteinas metodo biuret
Páginas: 9 (2130 palabras)
Publicado: 3 de abril de 2011
Universidad Autónoma Metropolitana.
Unidad Xochimilco.
División de ciencias biológicas y de la salud.
Tronco común divisional de ciencias biológicas y de la salud.
Modulo: energía y consumo de sustancias fundamentales.
Ana Lara Monterrosa Cruz.
Roberto Jiménez Torres.
Practica No. 1
Determinación de proteínas.
OBJETIVO:
Manejar en el laboratorio el método de Biuretpara determinar proteínas.
Observar y determinar experimentalmente el efecto del pH sobre las proteínas de
la leche.
GENERALIDADES:
Investigación bibliográfica de los estudiantes sobre calorimetría y punto isoeléctrico de proteínas.
MARCO TEORICO:
Proteínas: son macromoléculas formadas por cadenas lineales aminoácidos, unidos entre sí por medio de enlaces peptídicos entre el grupocarboxilo (-COOH) y los grupo aminos (NH3); se encuentran como mezclas complejas en los tejidos orgánicos y desempeñan un papel muy importante en el organismo.
La cuantificación de una proteína que tiene una función biológica específica, por ejemplo una hormona, no da una información exacta acerca de esta actividad biológica, ya que la proteína puede estar inactivada en algún grado. Para lasproteínas que tienen funciones biológicas concretas se puede elegir entre la cuantificación química y el bioanálisis: Por la razón expuesta anteriormente se utiliza más a menudo la medida de la actividad catalítica de una enzima que su determinación química como proteína.
Métodos Generales De Cuantificación.
El primer factor a considerar para seleccionar un método de análisis es la naturaleza de lamuestra y la presencia de sustancias que pueden interferir. Las muestras liquidas son las más cómodas de manejar, aun que algunos métodos son también utilizables para analizar muestras solidas. A veces puede ser necesaria una etapa previa de purificación para eliminar las sustancias que interfieren. Esto se puede hacer precipitando las proteínas solubles, lavándolas y cuantificándolas después conun método adecuado. Cuando se utiliza el calor o los ácidos fuertes, se produce una precipitación irreversible, por lo que después es necesario utilizar un método del tipo Kjeldahl. Sin embargo el precipitado producido por sales, alcohol, etc., puede redisolverse en una base, resultando después utilizable un método como la reacción de biuret. Alternativamente, las sustancias que producen lainterferencia, que a menudo son pequeñas moléculas tales como aminoácidos y sales, pueden eliminarse por diálisis frente a un gran volumen de un tampón adecuado.
Método de Biuret
El nombre dado a este método es un cierto modo poco afortunado y propenso a equivocas, el método se desarrollo a partir de la observación de que el biuret daba un complejo de color purpura al reaccionar con unasolución alcalina de sulfato de cobre. En ausencia de otro más adecuado se ha mantenido el nombre de biuret, a pesar de su semejanza química en la cuantificación de proteínas es confusa. Si se ha utilizado, sin embargo para elucidar, la naturaleza del complejo de cobre formado. Los iones cobre forman un complejo de coordinación con los 4 cuerpos –NH nucleofilicos, que en reacción con las proteínasprovienen de los enlaces pepiticos de los aminoácidos. El complejo muestra máximo de absorción a 330 y 545nm. La absorbancia generalmente se mide 545nm, pues aun que es mayor la sensibilidad a 330nm, es más fácil que se presenten interferencias.
Los compuestos que contienen dos cualquiera de los grupos siguientes, unidos a través de un átomo de carbono o nitrógeno, dan una reacción similar:
Algunospolialcoholes, sobre todo la glicerina y el etilenglicol, forman también complejos similares, aun que el máximo de absorción varia ligeramente respecto al de los complejos cobre-proteína.
El reactivo de biuret esta formado por una solución alcalina de sulfato de cobre a la que se añade tartrato de sódico-potásico o citrato sódico para evitar que precipiten los iones cúpricos en forma en...
Unidad Xochimilco.
División de ciencias biológicas y de la salud.
Tronco común divisional de ciencias biológicas y de la salud.
Modulo: energía y consumo de sustancias fundamentales.
Ana Lara Monterrosa Cruz.
Roberto Jiménez Torres.
Practica No. 1
Determinación de proteínas.
OBJETIVO:
Manejar en el laboratorio el método de Biuretpara determinar proteínas.
Observar y determinar experimentalmente el efecto del pH sobre las proteínas de
la leche.
GENERALIDADES:
Investigación bibliográfica de los estudiantes sobre calorimetría y punto isoeléctrico de proteínas.
MARCO TEORICO:
Proteínas: son macromoléculas formadas por cadenas lineales aminoácidos, unidos entre sí por medio de enlaces peptídicos entre el grupocarboxilo (-COOH) y los grupo aminos (NH3); se encuentran como mezclas complejas en los tejidos orgánicos y desempeñan un papel muy importante en el organismo.
La cuantificación de una proteína que tiene una función biológica específica, por ejemplo una hormona, no da una información exacta acerca de esta actividad biológica, ya que la proteína puede estar inactivada en algún grado. Para lasproteínas que tienen funciones biológicas concretas se puede elegir entre la cuantificación química y el bioanálisis: Por la razón expuesta anteriormente se utiliza más a menudo la medida de la actividad catalítica de una enzima que su determinación química como proteína.
Métodos Generales De Cuantificación.
El primer factor a considerar para seleccionar un método de análisis es la naturaleza de lamuestra y la presencia de sustancias que pueden interferir. Las muestras liquidas son las más cómodas de manejar, aun que algunos métodos son también utilizables para analizar muestras solidas. A veces puede ser necesaria una etapa previa de purificación para eliminar las sustancias que interfieren. Esto se puede hacer precipitando las proteínas solubles, lavándolas y cuantificándolas después conun método adecuado. Cuando se utiliza el calor o los ácidos fuertes, se produce una precipitación irreversible, por lo que después es necesario utilizar un método del tipo Kjeldahl. Sin embargo el precipitado producido por sales, alcohol, etc., puede redisolverse en una base, resultando después utilizable un método como la reacción de biuret. Alternativamente, las sustancias que producen lainterferencia, que a menudo son pequeñas moléculas tales como aminoácidos y sales, pueden eliminarse por diálisis frente a un gran volumen de un tampón adecuado.
Método de Biuret
El nombre dado a este método es un cierto modo poco afortunado y propenso a equivocas, el método se desarrollo a partir de la observación de que el biuret daba un complejo de color purpura al reaccionar con unasolución alcalina de sulfato de cobre. En ausencia de otro más adecuado se ha mantenido el nombre de biuret, a pesar de su semejanza química en la cuantificación de proteínas es confusa. Si se ha utilizado, sin embargo para elucidar, la naturaleza del complejo de cobre formado. Los iones cobre forman un complejo de coordinación con los 4 cuerpos –NH nucleofilicos, que en reacción con las proteínasprovienen de los enlaces pepiticos de los aminoácidos. El complejo muestra máximo de absorción a 330 y 545nm. La absorbancia generalmente se mide 545nm, pues aun que es mayor la sensibilidad a 330nm, es más fácil que se presenten interferencias.
Los compuestos que contienen dos cualquiera de los grupos siguientes, unidos a través de un átomo de carbono o nitrógeno, dan una reacción similar:
Algunospolialcoholes, sobre todo la glicerina y el etilenglicol, forman también complejos similares, aun que el máximo de absorción varia ligeramente respecto al de los complejos cobre-proteína.
El reactivo de biuret esta formado por una solución alcalina de sulfato de cobre a la que se añade tartrato de sódico-potásico o citrato sódico para evitar que precipiten los iones cúpricos en forma en...
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