Proteinas
Información de la OMS para diagnóstico de laboratorio del nuevo virus de la Influenza A (H1N1) en seres humanos
Se enfatiza la recomendación que todas las muestras de influenza tipo A no subtificables sean enviadas de inmediato para el diagnóstico y la caracterización adicional a uno de los cinco Centros Colaboradores de la OMS para la gripe. 21 de mayo del 2009 Este documento presenta información sobre los medios de diagnóstico disponibles a la fecha indicada para el virus de la influenza tipo A humana (H1N1) A/California/4/2009 y virus similares. La información sobre el diagnóstico se actualizará cuándo ésta se encuentre disponible. Muestras Las muestras más apropiadas según lo recomendado por las investigaciones de la influenza estacional son aquellas del tracto respiratorio superior. Las muestras deben tomarse de los orificios nasales profundos (hisopo nasal), nasofaringe (hisopo nasofaríngeo), aspirado nasofaríngeo, garganta o aspirado bronquial. Todavía no se sabe qué muestra clínica proporciona el mejor rendimiento en el diagnóstico. La(s) persona(s) que tome(n) la muestra debe(n) cumplir con las precauciones apropiadas de toma de muestras ya que puede(n) exponerse a secreciones respiratorias de los pacientes. Hasta ahora, no existe ninguna información sobre el valor de diagnóstico de las muestras no respiratorias, por ejemplo, muestras de heces. Muestras de suero agudo y convaleciente deben usarse para la detección de los títulos ascendentes de anticuerpo. Pruebas de laboratorio Diagnostico molecular Los medios de diagnostico molecular son actualmente el método preferido para la influenza A (H1N1) linaje porcino (swl) virus (A/California/4/2009 y virus similares). El uso de ensayos con diferentes genes blancos es más apropiado para la identificación de este virus. Los siguientes genes blancos son importantes: gen matriz de la Influenza de tipo A; el gen de la hemaglutinina específico del virus de la Influenza A(H1N1) swl y el gen de la hemaglutinina específico de la Influenza estacional A H1/H3 y otros subtipos.
Los siguientes protocolos están actualmente disponibles: PCR convencional específico para influenza tipo A y RT‐PCR en tiempo real (véase anexos 1 y 2); RT‐PCR en tiempo real de los CDC (rRT‐PCR) para la detección y caracterización de la influenza tipo A (H1N1) (versión 2009)1 El análisis secuencial del producto del PCR del gen matriz de la influenza tipo A usando los cebadores de los protocolos de la OMS (véase anexo 1) diferenciará entre genes M de linaje porcino y virus H1N1 estacionales. Sin embargo, un análisis adicional debe ser realizado para confirmar el origen del virus. En este momento, las pruebas de RT‐PCR convencional están siendo evaluadas. Una actualización se publicará cuando este disponible. Aislamiento y tipificación del virus mediante la inhibición de hemaglutinina o la inmunofluorescencia: Se pueden utilizar los protocolos vigentes para el aislamiento de virus de la influenza estacional usando células de MDCK e inoculación de virus en huevos embrionados, aunque su sensibilidad está aún pendiente de determinarse (véase sección de bioseguridad abajo). Los eritrocitos de pavos, pollos, conejillos de indias y humanos se aglutinarán con el virus de la influenza A (H1N1) swl. Los anticuerpos policlonales específicos para el subtipo H1 de los virus de la influenza estacional del kit de la OMS no reaccionarán con la prueba de inhibición de hemaglutinación (HAI) del virus actual de la influenza A (H1N1). Los resultados obtenidos utilizando los anticuerpos monoclonales H1 del kit de la OMS no debe tomarse como comprobación concluyente y se recomienda realizar una verificación adicional. Pruebas de inmunofluorescencia rápida: La sensibilidad y especificidad de las pruebas de inmunofluorescencia rápida en el lugar ...
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