Proteinas

UNIVERSIDAD COOPERATIVA DE COLOMBIA
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CIENCIAS BASICAS BIOMEDICAS

PRÁCTICA DE Laboratorio 11

DETERMINACION DE LA PRESENCIA DE PROTEINAS.OBJETIVOS

Determinar la presencia de proteínas a través de la valoración cualitativa con el reactivo Biuret.

MATERIALES:

Tubos de ensayo
1 Pipeta graduada de 5 ml
1 Gradilla
1 Pera de goma
1Pinzas de tubo
1 Pipeta pasteur
Mecheros
Placa de calentamiento
Baño maría

Material a cargo del estudiante

Cinta de enmascarar
Toallas absorbentes
Guantes
Marcador
Gelatina sin saborClara de huevo
Goteros

Reactivos:
HCl 0.1 M
NaOH 0.1 M
HNO3
BIURET
NITRITO SODICO

Muestras problema:
Albúmina
Caseína
Gelatina
Aminoácidos (fenilalanina, triptófano, tirosina,glicina, lisina y alanina)


PROCEDIMIENTO

1. REACCION DE MILLON

Los compuestos que contienen un hidroxibenceno como radical reaccionan con el reactivo de Millon formando compuestosrojos. Los únicos aminoácidos fenólicos son la tirosina, y sus derivados y solo ellos dan una reacción positiva.

Tome 1 ml de muestra (aminoácido) añada 5 gotas de del reactivo de Millon
Calienteen un baño de agua hirviendo por 10 minutos.
Deje enfriar a temperatura ambiente y agregue 5 gotas de nitrito sódico,

Positivo: si observa una coloración rojo ladrillo.

2. PRUEBA DEL BIURETEl sulfato alcalino de cobre reacciona con compuestos que contienen dos o más enlaces peptídicos dando un complejo de coloración violeta, la intensidad del color obtenido es una medida del númerode enlaces peptídicos presentes en la proteína.

Tome 2 ml de muestra (agua, albúmina, caseína, gelatina)
Agregue 5 gotas de reactivo Biuret
Mezclar vigorosamente y observar los colores formados.Positivo: si observa una coloración violeta.

PRUEBA DESNATURALIZACION POR CALOR Y p H EXTREMOS

Tome tres tubos de ensayo y coloque 5 ml de cada una de las muestras problemas (albúmina,...