PROTEINAS



UNIDAD II
PURIFICACION Y METODOS DE ANÁLISIS DE PROTEÍNAS
LABORATORIO Nº 4.
CROMATOGRAFIA DE EXCLUSIÓN MOLECULAR.


ESCUELA DE TECNOLOGÍA MÉDICA.


RESUMEN: En este informe se presentael desarrollo de la purificación de una mezcla de moléculas (Hemoglobina y Cabalamina) a través de cromatografía de exclusión molecular.
La muestra fue sometida a elusión utilizando buffer (NaCL),y posteriormente recolectando el eluido para poder observar la coloración resultante para comprobar si el sistema cromatográfico separó la Hemoglobina de la Cabalamina, obteniendo resultadossatisfactorios, confirmando la validación del método para la purificación y análisis de las proteínas utilizadas en este práctico.



INTRODUCCIÓN:
La técnica de cromatografía es comúnmenteusada para aislar y purificar todo tipo de biomoléculas, como proteínas y separa componentes individuales de una mezcla compleja.
Todos los tipos de cromatografía se basan en un principio sencillo, lamuestra interactua con dos fases físicas: una móvil y otra estacionaria.La fase móvil puede ser líquida o gaseosa,mueve la muestra que contiene la fase móvil o estacionaria(sólida o líquida).
En estaoportunidad utilizaremos la Cromatografía de exclusión molecular esta es una clase de cromatografía sólido-líquido que permite la separación de moléculas en función a su tamaño; en esta técnica lafase estacionaria es un gel que está constituido por particulas con poros de un determinado tamaño.
Las moléculas se van separando en función de su tamaño, eluyendo en orden decreciente respecto a supeso molecular.



En este laboratorio se utilizará un kit comercial cuyo límite de exclusión es de 60.000 Da y se empleará en la separación de una mezcla de dos moléculas coloreadas: HemoglobinaBovina(rojiza) y Cabalamina o Vit. B12 (rosa). Estos colores contrastantes permiten visualizar la elución de ambas moléculas.



MATERIALES:

Kit de Cromatografia de exclusión molecular...