Proteinas

Introducción
Las proteínas se pueden separar en base a su carga neta por cromatografía de intercambio iónico. En este proceso de intercambio iónico, los iones que están unidos en formaelectrostática a una matriz insoluble y químicamente inerte se remplazan de manera reversible por los iones de la solución. Hay dos tipos de intercambiadores los catiónicos (carga negativa) y aniónicos (cargapositiva). Por lo tanto, los aniones y los cationes se unen a los intercambiadores aniónicos y catiónicos, respectivamente. La afinidad con la que un electrolito (o alguna molécula biológica) particularse une a un intercambiador iónico determinado depende de las identidades y concentraciones de los otros iones en solución debido a la competencia entre estos iones por los sitios de unión en elintercambiador. Las afinidades de unión de los electrolitos que portan grupos ácido-base también dependen en gran medida del pH debido a la variación de su carga neta con el pH.
En la purificación de unaproteína dada, se escogen el pH y la concentración salina de la solución buffer en la que esta disuelta la proteína, de manera que ésta se una con firmeza al intercambiador iónico seleccionado. Seaplica un volumen pequeño de la solución de proteína impura en la parte superior de la columna que contiene al intercambiador iónico, y se lava la columna con el mismo buffer. Las distintas proteínas seunen al intercambiador iónico con diferentes afinidades. A medida que se lava la columna con el buffer, lo que se denomina elución, las proteínas con afinidades relativamente bajas por elintercambiador iónico atraviesan la columna mas rápido que las que tienen afinidades mayores. Cuanto mayor es la afinidad de unión de la proteína por el intercambiador iónico superior es el retardo que sufre. Porlo tanto, las proteínas que se unen con firmeza al intercambiador pueden eluirse mediante el cambio de la solución de elución a una de mayor concentración salina (o un pH diferente), un proceso...